绿色荧光蛋白转基因小鼠的建立及可视化胚胎工程的研究

论文摘要

绿色荧光蛋白（GFP）是海洋生物水母（aequorea,victoria）体内分离纯化出来的一种能发射强烈荧光的特殊蛋白质,在无任何协同因子、底物或附加基因产物存在的情况下就能产生稳定的荧光,而且这种荧光很容易通过荧光显微镜或者肉眼即可观察到。因此,GFP是一种全新的、应用广泛的遗传标记（genetic marker）和蛋白质标记物（protein tag）。 绿色荧光蛋白可以提高转基因动物的制备效率,即将待转的目的基因构件与GFP基因串联起来一并整合,由于GFP基因的表达产物在胚胎发育的早期即可检测到,我们可以只选择那些只表达了GFP阳性重组体的胚胎进行移植,这样即减少移植胚胎的盲目性,又提高转基因动物的制作效率。 用显微注射法将GFP基因注入FVB/NJ小鼠受精卵原核内,获得的子代鼠3周后,提取鼠尾基因组DNA,应用PCR技术进行检测,获得5只PCR阳性小鼠:通过整体成像仪观察其中3只（Fo）有绿色荧光表达。对Fo代转基因小鼠进行传代,获得子代小鼠通过整体成像仪观察7只（F1）有绿色荧光表达,继而在F1代GFP转基因小鼠中进行交配,得到子代鼠,经整体成像仪观察,发现35只（F2）小鼠有绿色荧光表达,表明初步建立了全身有荧光表达并能传代的GFP转基因小鼠。这为我们进行可视化胚胎工程研究奠定了基础。

论文目录

• 中文摘要
• ABSTRACT
• 第一部分 绿色荧光蛋白（GFP）转基因小鼠的建立
• 前言
• 1.材料和方法
• 1.1.材料
• 1.2.方法
• 2.结果与讨论
• 2.1 结果
• 2.2 讨论
• 小结
• 参考文献
• 第二部分 绿色荧光蛋白（GFP）转基因小鼠可视化胚胎工程的研究
• 前言
• 1.材料和方法
• 1.1.材料
• 1.2.方法
• 2.结果与讨论
• 2.1 结果
• 2.2 讨论
• 小结
• 参考文献
• 附录：英文缩略
• 攻读硕士学位期间发表的主要论文
• 攻读硕士学位期间所做的工作
• 攻读硕士学位期间掌握的技术
• 致谢
• 原创性声明