毛细管细胞膜色谱对β-内酰胺抗生素与细胞膜相互作用的初探

论文摘要

细胞膜色谱法的优势是最大限度地保持了细胞膜的整体性和膜受体的立体结构和活性。药物与细胞膜及膜受体间的立体作用（疏水性、电荷、氢键）将会不同程度地通过色谱的各种表征参数定量反映。细胞膜色谱法无须放射性配体标记,膜受体处于自然活性状态,不用制备人工膜,简便易行,一个细胞膜色谱柱可反复应用,提高了工作效率。但是细胞膜色谱法对固定相的制备、色谱柱流动相、pH、柱温等要求苛刻。本文的创新点在于,利用溶胶-凝胶技术制备细胞膜载体,通过毛细管电泳法研究不同细胞膜和药物的相互作用以及毛细管细胞膜色谱法在β-内酰胺抗生素分离中的应用。全文分为三部分：第一章：介绍了毛细管电泳原理及应用,溶胶-凝胶技术及应用,生物色谱在药物分析中的应用。第二章：毛细管电泳方法研究了细胞膜和β-内酰胺药物的相互作用,探索了毛细管细胞膜色谱在研究药物和细胞膜相互作用,新药筛选方面的应用性。实验中考察了细胞膜涂布量、缓冲液pH、细胞膜种类（人红细胞、小鼠红细胞、S-180细胞）对药物保留因子的影响。第三章：利用毛细管细胞膜色谱法对β-内酰胺抗生素进行分离,考察了各种因素对药物分离的影响。实验结果表明,毛细管细胞膜色谱法可以直接用于研究药物与生物膜的相互作用,由此得到的色谱参数对研究药物作用机理和新药开发与筛选有重要的参考价值。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第1章 绪论
• 1.1 毛细管电泳发展历程
• 1.2 毛细管电泳的基本分离原理以及分离模式
• 1.2.1 毛细管区带电泳（CZE）
• 1.2.2 毛细管凝胶电泳（CGE）
• 1.2.3 胶束电动毛细管色谱（MECC）
• 1.2.4 毛细管等电聚焦（CIEF）
• 1.2.5 毛细管等速电泳（CITP）
• 1.2.6 毛细管电色谱（CEC）
• 1.3 溶胶-凝胶技术
• 1.3.1 制备开管毛细管气相色谱柱的应用
• 1.3.2 制备开管毛细管液相色谱柱的应用
• 1.3.3 制备开管毛细管电泳柱及电色谱柱的应用
• 1.4 生物色谱法
• 1.4.1 分子生物色谱法（Molecular Biochromatography）
• 1.4.2 细胞膜色谱法（Biomembrane chromatography）
• 1.4.3 细胞生物色谱法（Cell Biochromatography）
• 第2章 毛细管电泳方法研究细胞膜和药物的相互作用
• 2.1 引言
• 2.2 实验部分
• 2.2.1 主要的仪器与试剂
• 2.2.2 应用公式
• 2.2.3 实验过程
• 2.3 结果与讨论
• 2.3.1 电泳电压
• 2.3.2 缓冲溶液的浓度
• 2.3.3 细胞膜固定于毛细管内壁的机制
• 2.3.4 HG-560/TMOS浓度比对溶胶-凝胶反应的影响
• 2.3.5 细胞膜涂布量对药物保留行为的影响
• 2.3.6 缓冲液pH值对抗生素药物保留行为的影响
• 2.3.7 细胞膜种类对抗生素药物保留行为的影响
• 2.3.8 柱子的稳定性的考察
• 2.4 结论
• 第3章 毛细管细胞膜色谱在β-内酰胺抗生素分离中的应用
• 3.1 引言
• 3.2 实验部分
• 3.2.1 主要的仪器与试剂
• 3.2.2 实验过程
• 3.3 结果与讨论
• 3.3.1 细胞膜对抗生素药物保留行为的影响
• 3.3.2 细胞膜涂布量对药物分离的影响
• 3.3.3 背景缓冲液pH值对药物分离的影响
• 3.3.4 细胞膜种类对药物分离的影响
• 3.3.5 细胞膜柱重现性的考察
• 3.4 结论
• 参考文献
• 硕士研究生期间发表和待发表论文
• 致谢