本文主要研究内容
作者袁白银,刘钟颖（2019）在《小鼠cofilin2蛋白的原核表达及纯化》一文中研究指出：[目的]构建小鼠cofilin2原核表达载体并纯化表达产物。[方法]以胚胎期小鼠心脏组织的c DNA为模板PCR扩增cofilin2基因,经酶切连接表达载体PGEX-4T-1后转化入大肠杆菌E. coli BL21感受态细胞中,利用异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)进行诱导表达及优化,利用SDS-PAGE凝胶电泳,考马斯亮蓝R-250进行染色,检测GST-cofilin2的表达情况。通过谷胱甘肽树脂(Glutathione Resin)亲和层析进行纯化,最后通过Western Blot进行验证。[结果]PCR成功扩增cofilin2基因,双酶切及测序结果表明p GEX-4T-1-cofilin2原核表达载体构建成功,SDS-PAGE鉴定表明,在22℃、200μmol/L的IPTG能诱导出大量可溶性的GST-cofilin2蛋白,分子量为43 k Da。Western Blot验证得到纯化的GST-cofilin2。[结论]成功构建小鼠cofilin2原核表达载体,纯化得到的重组小鼠cofilin2蛋白可用于后续的生物学研究。
Abstract
[mu de ]gou jian xiao shu cofilin2yuan he biao da zai ti bing chun hua biao da chan wu 。[fang fa ]yi pei tai ji xiao shu xin zang zu zhi de c DNAwei mo ban PCRkuo zeng cofilin2ji yin ,jing mei qie lian jie biao da zai ti PGEX-4T-1hou zhuai hua ru da chang gan jun E. coli BL21gan shou tai xi bao zhong ,li yong yi bing ji -β-D-liu dai bi nan ban ru tang gan (IPTG)jin hang you dao biao da ji you hua ,li yong SDS-PAGEning jiao dian yong ,kao ma si liang lan R-250jin hang ran se ,jian ce GST-cofilin2de biao da qing kuang 。tong guo gu guang gan tai shu zhi (Glutathione Resin)qin he ceng xi jin hang chun hua ,zui hou tong guo Western Blotjin hang yan zheng 。[jie guo ]PCRcheng gong kuo zeng cofilin2ji yin ,shuang mei qie ji ce xu jie guo biao ming p GEX-4T-1-cofilin2yuan he biao da zai ti gou jian cheng gong ,SDS-PAGEjian ding biao ming ,zai 22℃、200μmol/Lde IPTGneng you dao chu da liang ke rong xing de GST-cofilin2dan bai ,fen zi liang wei 43 k Da。Western Blotyan zheng de dao chun hua de GST-cofilin2。[jie lun ]cheng gong gou jian xiao shu cofilin2yuan he biao da zai ti ,chun hua de dao de chong zu xiao shu cofilin2dan bai ke yong yu hou xu de sheng wu xue yan jiu 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自生物技术的袁白银,刘钟颖，发表于刊物生物技术2019年01期论文，是一篇关于原核表达论文,蛋白纯化论文,融合蛋白论文,生物技术2019年01期论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自生物技术2019年01期论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
标签：原核表达论文; 蛋白纯化论文; 融合蛋白论文; 生物技术2019年01期论文;