常山碱的提取、分离及其药效学研究

论文摘要

鸡球虫病是一种重要的寄生虫病,分布广,感染率高,常发生在15～50日龄的雏鸡,若不能有效控制,其现场发病率可达50 %～70 %,死亡率可达20 %～30 %,严重爆发时其死亡率可高达80 %。据统计,全球养鸡业每年仅球虫病造成经济损失就达20亿英镑。目前对该病的防治仍以化学合成药及抗生素为主,但由于长期应用,易产生抗药性,且在畜产品中因药物残留而影响人类的健康。鉴于此,人们将目光转向非抗生素防治研究,如中草药。迄今为止,关于常山中单体的分离报道较为深入,而常山中生物碱提取工艺和分离方法的报道较少,并且在常山的药理作用的研究中,关于常山中生物碱对畜禽生产常见的球虫病的研究未见报道。因此,本文由此出发,对常山中生物碱开发为新型兽药的几个关键的步骤进行了一些研究,包括生物碱的提取、分离及其抗球虫活性的研究,以期为常山的工业化生产和进一步开发利用提供理论依据。主要结果如下:1常山碱含量测定方法的确定。利用常山碱在碱水条件下水解,产生邻氨基苯甲酸并将其与N-1-萘基-乙二胺盐酸盐溶液显色的原理,用紫外分光光度计比色法测定得出,常山碱提取物的总碱含量为0.327 %。2常山总生物碱提取工艺的研究。运用正交实验,分别以浸膏重量和常山碱含量作为评价指标,考察了超声波提取工艺的效果,运用SPSS 14.0软件对结果进行分析,得到优化的提取工艺如下:其提取条件为提取温度50℃,料液比1:5,提取时间1 h。3为了评价常山碱的安全性,对其进行了小白鼠的急性毒性试验。预试验初步确定用药剂量,正式试验取60只昆明种小白鼠,灌胃给药后,连续观察7天,记录小白鼠的急性毒性反应,并通过改良寇氏法计算常山碱对小白鼠的半数致死量（LD50）及LD50的95 %可信限。结果表明,给药组部分小白鼠出现中毒反应并死亡,剖检主要脏器未见病理改变,测得LD50为18.16 g/kg体重,LD50的95 %可信限为15.35 g/kg～21.49 g/kg体重。实验结果初步提示,常山碱的毒性很低,临床用药安全可靠。4在常山总生物碱抗鸡球虫病和预防鸡球虫试验中,用艾美耳球虫接种雏鸡人工引发鸡球虫病。通过不同剂量常山总生物碱防治鸡球虫病作比较,确定鸡球虫病最佳临床治疗和预防剂量,其中以20 mg/kg给药可以达到良好的治疗鸡球虫病效果,其抗球虫指数（ACI为166.31）。

论文目录

• 摘要
• Summary
• 中英文缩略词表
• 第一部分 文献综述
• 前言
• 1 常山研究进展
• 1.1 常山概述
• 1.2 常山的主要化学成分
• 1.3 常山炮制工艺研究
• 1.4 常山的药理作用及临床应用
• 1.5 常山的毒副作用与配伍禁忌
• 2 生物碱研究概况
• 2.1 生物碱概述
• 2.2 生物碱的分类
• 2.3 生物碱的存在形式
• 2.4 生物碱的性质与检识
• 2.5 生物碱的提取与分离
• 2.6 生物碱的含量测定方法
• 2.7 生物碱的应用前景
• 3 提取中草药有效成分防治鸡球虫病的概况
• 3.1 防治鸡球虫病的中草药
• 3.2 提取中草药有效成分防治鸡球虫病
• 3.3 展望
• 第二部分 试验部分
• 第一章 常山总生物碱的提取分离
• 1 材料与方法
• 1.1 材料与仪器
• 1.2 常山薄层色谱鉴别
• 1.3 超声波提取方法正交试验
• 1.4 常山总生物碱含量测定
• 2 结果
• 2.1 常山薄层色谱鉴别
• 2.2 常山总生物碱含量测定
• 3 讨论
• 3.1 常山薄层色谱鉴别
• 3.2 常山总生物碱含量测定
• 3.3 超声波提取方法正交试验
• 第二章 常山总生物碱急性毒性实验研究
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 第三章 常山总生物碱抗鸡球虫试验
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 结论
• 致谢
• 参考文献
• 个人简介
• 导师简介