小麦谷蛋白差异蛋白质组学及其对品质影响的初步研究

小麦谷蛋白差异蛋白质组学及其对品质影响的初步研究

论文摘要

随着生活水平的提高,人们对小麦的加工品质提出了更高的要求。小麦面筋蛋白对小麦的加工特性有着非常重要的影响,其主要组成成分是小麦籽粒中的储存蛋白,因此全面了解小麦籽粒储存蛋白对小麦品质的影响必然有助于小麦品质改良的研究。本研究选用7个普通小麦品种作为供试材料,研究了其籽粒蛋白组分的积累规律,测定了其粗蛋白含量、微量SDS沉淀值、湿面筋含量、干面筋含量、面筋指数、降落值等常用理化指标及面粉粉质特性,并且对籽粒储存蛋白组分与常用理化指标作了相关性分析。对这7个材料的谷蛋白大聚合体(GMP)含量、总蛋白聚合体含量(TPP)、谷蛋白大聚合体与总蛋白聚合体的比值(GMP/TPP)、谷蛋白大聚合体与粗蛋白的比值(GMP/CP)这4个理化指标与粉质仪参数之间的相关性进行了研究,确定了谷蛋白在小麦品质中的决定作用。选用品质差异显著的4个材料,按照HMW-GS组成分为两组,作为供试材料2,用单、双向电泳对其谷蛋白亚基组分进行分离,结合其品质性状对谷蛋白亚基的差异进行分析。主要结果如下:1不同品种小麦籽粒中清蛋白和球蛋白的含量不因为亚基组合不同而有大的差异,总体水平大致相同;和品质相关的醇溶蛋白和谷蛋白含量则因为不同的亚基组合出现较大差异,含有7+8、5+10亚基组合的品种,灌浆后期醇溶蛋白含量减少而谷蛋白含量增加;同样,从GMP含量动态曲线可知,含有7+8、5+10亚基组合对GMP的积累具有有利影响。2小麦籽粒蛋白组分中,只有麦谷蛋白含量与微量SDS沉淀值、面筋含量以及面筋指数均呈显著正相关。清蛋白和球蛋白与各品质指标之间没有明显的相关性。谷蛋白/(球蛋白+清蛋白+醇溶蛋白)的比值与沉淀值的关系较为密切。3利用SDS-PAGE对供试材料1的高分子量麦谷蛋白亚基进行初步分离鉴定,结果发现在Glu-1A位点有2种变异(1和Null),在Glu-1B位点有2种变异(7+8和14+15),在Glu-1D位点上有3种变异(5+10、2+12和2+10)。利用A-PAGE和A-PAGE×SDS-PAGE两种不同方法,对供试材料2中两组材料进行分析,结果发现品质好的品种H—6和J210都具有与面包加工品质有重要作用的低分子量麦谷蛋白亚基LMW-2型。4利用IEF×SDS-PAGE双向电泳技术对供试材料2中两组材料的谷蛋白进行差异蛋白组学分析,通过双向电泳图像处理软件PDQuestTM8.0 Advanced分析电泳图谱,结果发现品质好的品种H—6和J210所具有的蛋白点数量和表达量都高于品质较差绵阳11和川农19。对品质好的两个品种的双向电泳图谱分析,发现在LMW-2型蛋白点位置及其下方的位置,具有相同的蛋白点较多,而且H—6在这些位置上的蛋白点表达量高于J210。由此说明LMW-2型谷蛋白亚基及其他未知的低分子量谷蛋白对品质有重要影响,其机理有待进一步研究。

论文目录

  • 摘要
  • Abstract
  • 一 文献综述
  • 1 麦谷蛋白研究动态
  • 1.1 高分子量麦谷蛋白亚基(HMW-GS)的遗传及生化研究进展
  • 1.2 高分子量麦谷蛋白亚基与小麦品质关系的研究进展
  • 1.3 低分子量麦谷蛋白亚基(LMW-GS)的遗传及生化研究进展
  • 1.4 低分子量麦谷蛋白亚基与小麦品质关系的研究进展
  • 1.5 高、低分子量麦谷蛋白亚基的分离分析方法
  • 2. 麦醇溶蛋白(Gliadin)的研究动态
  • 2.1 麦醇溶蛋白(Gliadin)的遗传及生化研究进展
  • 2.2 麦醇溶蛋白和小麦品质关系的研究进展
  • 3. 小麦谷蛋白大聚合体(GMP)的研究进展
  • 4. 植物蛋白质组学研究动态
  • 4.1 蛋白质组学的概念
  • 4.2 植物蛋白质组研究状况
  • 4.3 差异蛋白质组研究概况
  • 4.4 小麦蛋白质组学研究概况
  • 5. 本研究的目的和意义
  • 二 材料与方法
  • 1. 材料
  • 2. 方法
  • 2.1 取样
  • 2.2 小麦籽粒粗蛋白含量的测定
  • 2.3 蛋白质组分的提取及含量测定
  • 2.4 GMP含量的测定
  • 2.5 样品微量SDS沉淀值的测定
  • 2.6 面筋指标测定
  • 2.7 降落数值的测定
  • 2.8 小麦面粉粉质特性的测定
  • 2.9 谷蛋白常规电泳分析
  • 2.10 IEF×SDS-PAGE双向电泳
  • 3. 统计分析
  • 三 结果与分析
  • 1. 小麦籽粒储存蛋白质组分积累规律
  • 1.1 不同品种小麦籽粒清蛋白和球蛋白积累规率
  • 1.2 不同品种小麦籽粒醇溶蛋白积累规律
  • 1.3 不同品种小麦籽粒谷蛋白积累规律
  • 1.4 不同品种小麦籽粒GMP积累规律
  • 1.5 籽粒总蛋白积累动态变化规律
  • 2 小麦品质性状间的相关性分析
  • 2.1 供试材料品质性状的差异
  • 2.2 小麦籽粒储存蛋白组分与小麦部分品质性状的关系
  • 2.3 小麦谷蛋白大聚合体与品质指标间的相关性分析
  • 3. 供试材料的谷蛋白亚基凝胶电泳分析
  • 3.1 所有供试材料的常规电泳分析(SDS-PAGE、A-PAGE)
  • 3.2 谷蛋白亚基的双向电泳分析(A-PAGE×SDS-PAGE和IEF×SDS-PAGE)
  • 四 讨论
  • 1 小麦籽粒蛋白组分的积累规律
  • 2 小麦籽粒储存蛋白质组分对品质性状的影响
  • 3 谷蛋白大聚合体(GMP)对小麦品质的影响
  • 4 麦谷蛋白差异蛋白质组学的分析
  • 5 谷蛋白的分离分析方法
  • 五 结论
  • 六 有待进一步研究的问题
  • 参考文献
  • 致谢
  • 攻读硕士学位期间发表的论文
  • 相关论文文献

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