枯草芽孢杆菌BS-2对病原真菌的抑制作用及其活性成分分析

枯草芽孢杆菌BS-2对病原真菌的抑制作用及其活性成分分析

论文摘要

通过对峙培养、发酵液的抑菌实验,发现枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BS-2对脉孢菌Neurospora、木霉Trichoderma、疣孢霉Mycogone都有较强的抑制作用,而且BS-2还会产生挥发性物质抑制木霉孢子的萌发。采用紫外诱变对BS-2进行诱变获得对脉孢菌抑制能力提高的菌株编号为BS-2-E,以及无抑制能力的菌株编号为BS-2-N。用LC-MS分析BS-2,BS-2-E,BS-2-N以及脉孢菌发酵液诱导培养BS-2的盐酸粗提物,比较其抑菌成分间的区别。初步推断BS-2抑制脉孢菌的主要物质是伊枯草菌素和芬枯草菌素。本文还采用添加BS-2堆料发酵进行生物防治脉孢菌上的初步探索。

论文目录

  • 中文摘要
  • Abstract
  • 引言
  • 1.枯草芽孢杆菌在生产上应用
  • 2.枯草芽孢杆菌主要抗菌成分
  • 3.枯草芽孢杆菌抗菌成分的作用机理
  • 4.枯草芽孢杆菌诱变育种
  • 正文
  • 1 材料与方法
  • 1.1 实验材料
  • 1.1.1 菌株来源
  • 1.1.2 培养基
  • 1.2 实验方法
  • 1.2.1 BS-2对病原真菌的抑制作用
  • 1.2.1.1 BS-2对病原真菌的拮抗实验
  • 1.2.1.2 Bs-2发酵液对真菌的抑菌试验
  • 1.2.1.3 BS-2挥发性物质对病原真菌菌丝及孢子的抑制作用
  • 1.2.1.4 盐酸沉淀法分离BS-2外分泌抗真菌蛋白抑制作用
  • 1.2.2 枯草芽孢杆菌BS-2脂肽类抗生素成分分析
  • 1.2.2.1 枯草芽孢杆菌BS-2突变株的获得
  • 1.2.2.2 BS-2抑菌能力的诱导试验
  • 1.2.2.3 BS-2粗提液的液质联用检测
  • 1.2.3 BS-2在食用菌栽培中的应用
  • 1.2.3.1 BS-2对栽培发酵料的影响
  • 1.2.3.2 培养料对脉孢菌生长影响
  • 1.2.3.3 培养料对食用菌生长的影响
  • 2 结果与分析
  • 2.1 BS-2对病原真菌的抑制作用
  • 2.1.1 BS-2对病原真菌的拮抗作用
  • 2.1.2 Bs-2发酵液对真菌的抑制效果
  • 2.1.3 BS-2挥发性物质对病原真菌菌丝及孢子的抑制作用
  • 2.1.4 BS-2盐酸粗提物抑菌作用
  • 2.2 枯草芽孢杆菌BS-2脂肽类抗生素成分分析
  • 2.2.1 枯草芽孢杆菌BS-2突变株的获得
  • 2.2.2 BS-2抑菌能力的诱导效果
  • 2.2.3 枯草芽孢杆菌发酵液粗提样的LC-MS检测及比较分析
  • 2.2.3.1 枯草芽孢杆菌2L和2NL质谱响应峰的比较
  • 2.2.3.2 枯草芽孢杆菌2L和2EL质谱响应峰的比较
  • 2.2.3.3 枯草芽孢杆菌2L和2I质谱响应峰的比较
  • 2.3 BS-2在食用菌栽培中的应用
  • 2.3.1 BS-2对栽培发酵料的影响
  • 2.3.1.1 培养料温度变化
  • 2.3.1.2 培养料pH变化
  • 2.3.1.3 培养料细菌数变化
  • 2.3.1.4 培养料真菌数变化
  • 2.3.2 BS-2对脉孢菌生长速度的影响
  • 2.3.2.1 对照组不同堆料天数对脉孢菌菌丝生长速度的影响
  • 2.3.2.2 处理组不同堆料天数脉孢菌菌丝生长速度的影响
  • 2.3.2.3 对照组与处理组间不同堆料天数培养料对脉孢菌菌丝生长速度比较
  • 2.3.3 BS-2对平菇生长影响
  • 3 讨论
  • 3.1 枯草芽孢杆菌BS-2对病原真菌的抑制作用
  • 3.2 质谱分析BS-2抑制脉孢菌活性成分
  • 3.3 BS-2在食用菌栽培中的应用
  • 结论
  • 参考文献
  • 附录Ⅰ 英文缩略词
  • 附录Ⅱ 2L、2EL、2I和2NL在质谱仪具有紫外吸收的响应峰
  • 致谢
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