胡芦巴多糖A2对实验性糖尿病大鼠肾脏病变的改善作用及其机制的研究

论文摘要

糖尿病肾病（DN）是糖尿病常见和严重的微血管并发症之一,其主要病理特点是肾小球基底膜增厚和以肾小球系膜区为主的细胞外基质（ECM）积聚。DN的发病机制复杂,是多种因素共同作用的结果,迄今尚无满意的治疗方法。胡芦巴为豆科植物胡芦巴（Trigonella foenum-graecum L.）的干燥成熟种子,已有研究表明,胡芦巴具有降血糖作用,但胡芦巴降血糖作用的有效成分（部位）、细胞和生物化学机制尚不清楚。结缔组织生长因子（CTGF）作为一种新的致纤维化的生长因子,日益引起人们的关注。胡芦巴对肾小球ECM和CTGF的影响及对DN的改善作用尚未见报道。本研究采用大鼠体内腹腔注射STz诱发的糖尿病模型和大鼠肾小球系膜细胞体外培养方法,应用R11-PCR、ELISA、形态学、免疫组化、Western blot等技术,研究了胡芦巴多糖A2对CTGF mRNA和蛋白质表达及其对肾脏功能、结构和ECM改变的影响,目的在于寻找防治DN的有效药物,为临床防治DN提供有益的线索。本研究结果证明,给予胡芦巴多糖A2可明显改善糖尿病大鼠肾脏功能及结构损害;胡芦巴多糖A2能明显下调大鼠’肾皮质、肾小球系膜细胞CTGFmRNA和蛋白质表达,并抑制肾小球ECM积聚。说明胡芦巴多糖A2可通过抑制CTGF表达,进而减轻ECM积聚。这些研究结果为胡芦巴用于临床防治糖尿病肾病提供了理论依据。

论文目录

• 英文缩写词表
• 文献综述
• 一、胡芦巴与糖尿病
• 二、糖尿病的发病机制
• 前言
• 材料与方法
• 材料
• 一、实验动物
• 二、主要试剂
• 三、主要仪器
• 四、胡芦巴多糖A2 的制备和理化特点
• 方法
• 一、体内实验
• （一） 实验动物
• （二） 糖尿病模型的制备
• （三） 动物分组
• （四） 给药方法
• （五） 主要观察指标
• （六） 形态学检测结果判定标准
• （七） 具体操作步骤
• （八） 统计学方法
• 二、体外实验
• （一） 含药血清的制备
• （二） 肾小球系膜细胞的分离和培养
• （三） 系膜细胞的传代
• （四） 实验分组及检测指标
• （五） 统计学方法
• 结果
• 体内实验
• 一、胡芦巴多糖A2 对糖尿病大鼠一般状态的影响
• （一） 各组大鼠血糖含量的比较
• （二） 各组大鼠DMF 和HbA1c 含量的比较
• （三） A2 对糖尿病大鼠体重、肾重的影响
• 二、A2 对糖尿病大鼠血脂水平的影响
• 三、肾功能检查结果
• 四、各组大鼠肾重/体重比和肾小球体积的比较
• 五、A2 对糖尿病大鼠MDA、CAT、GSH-Px、SOD 的影响
• 六、肾脏形态学检查
• （一） PAS 染色光镜观察
• （二） 透射电镜观察
• 七、免疫组化染色半定量分析
• 八、各组大鼠肾皮质TGF-β1 和CTGF mRNA 表达
• 九、各组大鼠肾皮质TGF-β1 及CTGF 蛋白表达的变化
• 体外实验
• 一、含A2 血清对系膜细胞增殖的影响
• 二、含A2 血清对系膜细胞培养上清中FN、Col IV、TGF-β1 和CTGF含量影响的量效关系
• 三、含A2 血清对系膜细胞培养上清中FN、Col IV、TGF-β1 和CTGF含量影响的时效关系
• 四 含A2 血清对系膜细胞TGF-β1 和CTGFmRNA 表达的影响
• 讨论
• 一、胡芦巴对实验性糖尿病大鼠肾脏功能和结构的影响
• 二、胡芦巴对实验性糖尿病大鼠肾脏ECM 积聚的影响
• 三、胡芦巴对CTGF 表达的影响
• 结论
• 参考文献
• 附图
• 攻读博士学位期间发表的论文
• 中文摘要
• 英文摘要
• 致谢