论文摘要
目的研究大鼠脑缺血再灌注损伤后,神经细胞巢蛋白(Nestin)在脑细胞不同部位、不同时间表达的分布情况和表达的时间顺序,探讨损伤后神经干细胞的激活规律,为治疗脑损伤提供理论依据。方法成年健康雄性SD大鼠30只,体重270±30g,以线栓法建立大脑中动脉缺血(MCAO)后再灌注模型,随机分为实验组和对照组,按缺血再灌注后不同时间将实验组分成四组,每组6只,对照组亦6只。应用免疫组化SABC法对实验组和对照组的再灌注后皮层缺血周边区、纹状体区、室管膜下区、海马齿状回区,各区不同时间Nestin的表达,观察神经细胞Nestin表达的分布情况和表达的时间顺序,以及不同部位、不同时间Nestin表达的规律,并分析、归纳表达的规律。结果Nestin在正常脑组织中广泛表达,但表达强度较弱,表达数量也较少。其中以室管膜下区Nestin阳性细胞最多。缺血再灌注6h各区即出现Nestin阳性细胞少量表达;1d时Nestin阳性细胞数增多,但以海马齿状回处明显;3d时Nestin阳性细胞数目明显增多,皮层缺血周边区增加显著;7d时Nestin阳性细胞数的量和形态变化最为显著,以海马区阳性细胞最多,其次为缺血周边区皮层,而缺血侧纹状体区的Nestin阳性细胞数目相对最少。各组的阳性细胞数用均数±标准差((?)±S)表示,各实验组与对照组均数相比P<0.01,差别极显著。各组与前组均数相比P<0.01,差别极显著。缺血再灌注损伤后Nestin阳性细胞在不同部位表达强度的变化是基本一致的;而各部位Nestin阳性细胞数目的增加在不同时间点是不相同的;各部位单位时间(每小时)内Nestin阳性细胞的增加速度有逐渐变缓的趋势。结论Nestin阳性细胞在正常成年脑组织中广泛表达,但表达强度较低。损伤后各部位Nestin阳性细胞的表达呈一致性增强。损伤后各部位单位时间(每小时)内Nestin阳性细胞的增殖速率逐渐变缓,提示神经干细胞被激活的速率在损伤早期是最大的。
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