大鼠肾脏缺血再灌注损伤VEGF、RhoA变化的实验研究

大鼠肾脏缺血再灌注损伤VEGF、RhoA变化的实验研究

论文摘要

目的1、观察缺血再灌注损伤(ischemia reperfusion injury,IRI)对大鼠肾脏组织形态、肾功能的影响。2、检测IRI后不同时段血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)在血清中的浓度及在肾脏组织的表达,探讨VEGF在大鼠肾脏IRI中的作用。3、检测肾组织中RhoA蛋白表达的变化,通过Rho激酶抑制剂—盐酸法舒地尔(Fasudil)预处理探讨RhoA/Rho激酶信号系统是否介导VEGF引起的肾血管通透性改变。方法建立大鼠肾脏缺血再灌注(IRI)动物模型,光学显微镜观察肾组织学变化;检测血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)水平以反映肾功能损害的程度;采用双抗体夹心酶联免疫吸附(ELISA)法和免疫组化二步法检测IRI术后不同时间段血、肾组织VGEF的表达水平;采用免疫组化二步法观察并分析RhoA蛋白在肾脏缺血再灌注过程肾组织中分布及表达。对结果进行方差分析及Pearson相关性分析。结果1、对照组(Con组)肾组织形态学未见明显异常;缺血再灌注组(IR组)肾组织出现明显的组织学改变,光镜下主要表现为:肾小管上皮细胞坏死、脱落,管壁完整性破坏,组织损伤以再灌注后48h最严重;盐酸法舒地尔治疗组(F治疗组)肾小管组织形态学损伤明显减轻,可见部分肾小管上皮细胞肿胀变性,无明显坏死,小管基底膜破坏程度较IR组明显减轻。2、Con组各时相血清Scr、BUN水平较低,各时相之间无明显差异(P>0.05);IR组Scr、BUN水平于再灌注后6h开始升高(115.12±12.87umol/L、18.41±2.29mol/L), 48h达到峰值(296.11±12.96 umol/L、50.42±5.66mol/L),72h后下降为(228.32±34.89 umol/L、26.37±3.32mol/L),各时相与Con组相比差异均有显著性(P<0.01);F治疗组Scr、BUN水平显著低于IR组(P<0.01),与相应时段IR组比较差异具有显著性(P <0.01)。3、Con组各不同时段间肾小管坏死评分差异无统计学意义(P>0.05);IR组肾小管坏死评分于再灌注后6h开始升高(44.3±3.50),且随再灌注时间延长,肾小管坏死评分逐渐增强,48h达高峰(148.7±5.43),72h后开始下降(122.5±3.78),各时间点与Con组比较差异均有显著性(P<0.01);F治疗组再灌注后6h、12h、24h、48h、72h肾小管坏死评分与相应时段IR组比较差异具有显著性(P <0.01),但仍明显高于Con组(P<0.01)。4、Con组各时相血清VEGF水平较低,各时相之间无明显差异(P>0.05);IR组血清VEGF水平于再灌注后6h开始升高(1837.3±107.2 umol/L),12h达到峰值(1913.8±101.8 umol/L),24h后下降至正常(1477.2±52.9umol/L),其中IR组6h、12h与Con组相比差异有显著性(P<0.01);F治疗组6h、12h血清VEGF水平显著低于IR组(P<0.05) ,分别为(1596.2±76.0 umol/L) ,(1620.9±59.2 umol/L)。5、VEGF蛋白在Con组肾组织微量表达,各时相之间无明显差异(P>0.05);IR组再灌注6h肾小管VEGF表达开始增强(37.7±4.68%),12h达高峰(62.8±4.86%),24h表达开始减弱(41.9±2.02%),其中IR组6h、12h、24h、48h肾小管VEGF表达与相应时段Con组对比均显著升高,差异有统计学意义(P<0.01);F治疗组6h、12h、24h、48h肾小管VEGF表达明显减弱(19.0±1.46%),(47.9±2.01%),(31.4±1.15%),(24.8±0.93 %),与IR组比较差异有统计学意义(P<0.01)。6、RhoA蛋白在Con组肾组织微量表达,各时相之间无明显差异(P>0.05);IR组再灌注6h肾小管RhoA表达开始增强(35.3±4.38%),12h达高峰(59.9±4.57%),24h表达开始减弱(43.1±3.48%),其中IR组6h、12h、24h、48h肾小管RhoA表达与相应时段Con组对比均显著升高,差异有统计学意义(P<0.01);F治疗组6h、12h、24h、48h肾小管RhoA表达明显减弱(18.4±1.08%),(46.7±1.81%),(33.5±1.47%),(23.8±0.99 % ),与IR组比较差异有统计学意义(P<0.01)。7、在IR组中,血VEGF水平与肾小管VEGF表达呈正相关(r=0.683,P<0.01);与血Scr、BUN、肾小管坏死评分无显著相关(r=0.243,P>0.05;r=0.236,P>0.05;r=0.094,P>0.05)。8、在IR组中,肾小管VEGF表达与血VEGF水平、血Scr、BUN、肾小管坏死评分均呈正相关(r=0.683,P<0.01;r=0.561,P<0.01;r=0.552,P<0.01;r=0.364,P<0.01)。结论1.缺血60分钟后恢复灌注,可导致实验大鼠肾组织学损伤,引起肾功能减退,损害最严重是在IRI后48小时。2.血清VEGF水平及肾小管VEGF表达可能是IRI早期肾脏缺血缺氧的监测指标,并且可能是机体对缺血缺氧保护、代偿的结果。3.肾小管内VEGF表达是增高的,其增高程度可以作为反映肾脏IRI严重程度的指标。4.肾缺血再灌注损伤过程中,RhoA/Rho激酶信号通路可能介导了VEGF引起的肾间质微血管通透性增加。

论文目录

  • 中文摘要
  • 英文摘要
  • 符号说明
  • 前言
  • 材料与方法
  • 一、实验对象
  • 二、试剂与仪器
  • 三、实验方法
  • 四、统计学分析方法
  • 结果
  • 讨论
  • 结论
  • 附图表
  • 参考文献
  • 综述
  • 参考文献
  • 致谢
  • 攻读学位期间发表的学术论文
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    • [4].RhoA蛋白在胃癌组织中的表达及临床意义[J]. 华夏医学 2011(01)
    • [5].RhoA在上皮性卵巢癌细胞中的表达与侵袭性的相关性[J]. 细胞生物学杂志 2008(04)
    • [6].食管癌中RhoA蛋白的表达及意义[J]. 海南医学院学报 2015(04)
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    • [8].螨性哮喘患者支气管肺泡灌洗液中RhoA的表达水平[J]. 南方医科大学学报 2009(07)
    • [9].肝癌组织RhoA表达及与浸润转移的关系[J]. 现代消化及介入诊疗 2020(01)
    • [10].肝细胞胰岛素抵抗模型中RhoA的表达及其与胰岛素抵抗的相关性[J]. 河北北方学院学报(自然科学版) 2020(08)
    • [11].RhoA与胃癌的相关研究进展[J]. 中国实用医药 2016(22)
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    • [13].法舒地尔和RhoA沉默对神经干细胞增殖的影响[J]. 中国组织工程研究与临床康复 2011(10)
    • [14].口腔鳞状细胞癌中RhoA的表达及作用[J]. 口腔医学 2008(03)
    • [15].RhoA在肝纤维化发生与发展中的作用[J]. 世界华人消化杂志 2016(11)
    • [16].RhoA蛋白在人非小细胞肺癌中的表达及临床意义[J]. 中国医科大学学报 2014(08)
    • [17].脊髓损伤模型大鼠神经修复与法舒地尔和RhoA基因沉默的干预[J]. 中国组织工程研究与临床康复 2011(33)
    • [18].沉默RhoA基因对骨髓间充质干细胞静脉移植治疗脑梗死大鼠的作用[J]. 中国组织工程研究与临床康复 2010(45)
    • [19].RhoA调节失血性休克大鼠血管反应性的机制[J]. 中国病理生理杂志 2009(10)
    • [20].辛伐他汀对急性心肌梗死大鼠RhoA表达及心室重塑的影响[J]. 第三军医大学学报 2008(12)
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    • [22].珍宝丸对大鼠脊髓损伤后RhoA的调节作用[J]. 内蒙古医学杂志 2015(03)
    • [23].单增李斯特菌感染抑制HepG2细胞RhoA表达并促进其凋亡[J]. 细胞与分子免疫学杂志 2016(05)
    • [24].星形细胞瘤脑血容量与RhoA表达相关性研究[J]. 蚌埠医学院学报 2009(08)
    • [25].RhoA、Ki-67的过表达促进胃癌的浸润转移[J]. 黑龙江医药科学 2009(06)
    • [26].RhoA在内皮-单核细胞激活多肽-Ⅱ增强血肿瘤屏障通透性中的作用[J]. 解剖科学进展 2014(01)
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    • [30].RhoA在食管癌中的表达及其机制研究[J]. 内蒙古中医药 2012(24)

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