论文摘要
本研究以骨形态发生蛋白15(BMP15)和骨形态发生蛋白受体(BMPR-IB)为候选基因,以内蒙古地方品种蒙古羊、内蒙古细毛羊、呼伦贝尔羊、中国美利奴羊(科尔沁型)为研究对象,对在生殖中起重要作用的BMP15基因和BMPR-IB基因进行多态性检测,以比较它们在不同绵羊品种中的多态性,旨在寻找与繁殖力相关的遗传标记,为内蒙古绵羊选育和改良提供理论依据。(1)通过对GenBank中绵羊BMP15基因作比对分析,在其外显子1序列内设计一对引物,采用PCR技术扩增其部分序列并进行PCR-SSCP多态性分析。实验结果在4个绵羊品种中均检测到BMP15的突变,且检测到的BMP15的突变在4个绵羊品种中均呈现三种基因型。分析实验结果显示:BMP15基因外显子1中虽然存在突变位点,但这一突变位点对绵羊繁殖力高低没有显著影响。(2)利用GenBank中绵羊的BMPR-IB序列信息,通过序列比对、分析,采用PCR技术扩增其部分序列并进行PCR-RFLP多态性分析。实验结果表明:繁殖力较高的中国美利奴羊(科尔沁型)BMPR-IB基因编码序列第746位碱基处发生了与Booroola Merino绵羊相同的突变(A746G),而繁殖力较低的蒙古羊、呼伦贝尔羊、内蒙古细毛羊、则没有发生这种突变。
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摘要Abstract1 前言1.1 骨形态发生蛋白15 基因研究现状1.1.1 骨形态发生蛋白15 基因的发现1.1.2 骨形态发生蛋白15 基因的结构1.1.3 骨形态发生蛋白15 基因的功能1.1.4 BMP15 基因突变位点分析1.2 骨形态发生蛋白受体研究现状1.2.1 骨形态发生蛋白受体的种类1.2.2 BMPR-IB 基因的发现及其在繁殖中的作用1.2.3 BMPR-IB 基因的作用机制1.3 DNA 分子标记方法的研究1.3.1 单核苷酸多态性(PCR-SSCP)技术简介1.3.2 限制性片段长度多态性(RFLP)简介1.4 研究的目的与主要内容2 内蒙古地方品种绵羊BMP15 基因多态性研究2.1 实验材料、仪器及试剂2.1.1 实验材料2.1.2 主要仪器和设备2.1.3 主要试剂和溶液2.2 主要实验步骤2.2.1 基因组 DNA 的提取2.2.2 BMP15 外显子1 PCR-SSCP 过程2.2.3 分析软件2.3 结果与分析2.3.1 基因组 DNA 的提取与检测结果2.3.2 PCR 扩增结果2.3.3 PCR-SSCP 电泳结果与分析2.3.4 不同绵羊品种 BMP15 基因频率分布统计分析2.3.5 不同绵羊品种 BMP15 基因频率差异检验2.3.6 BMP15 基因突变区的纯合子个体的克隆测序2.4 讨论3 内蒙古地方品种绵羊 BMPR-IB 基因多态性研究3.1 实验材料3.2 主要实验步骤3.2.1 绵羊基因组 DNA 的提取及检测3.2.2 BMPR-IB 基因的 PCR-RFLP 分析3.3 结果与分析3.3.1 PCR 扩增结果3.3.2 PCR-RFLP 电泳结果与分析3.3.3 不同绵羊品种 BMPR-IB 基因型分布统计分析3.3.4 不同绵羊品种 BMPR-IB 基因型分布差异检验3.3.5 BMPR-IB 基因 Q249R 位点纯合子个体的克隆测序3.4 讨论3.4.1 BMPR-IB 基因型在高低繁殖性能羊群中的分布3.4.2 BMPR-IB 基因突变与绵羊进化关系4 结论致谢参考文献作者简介
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