我国副鸡嗜血杆菌新血清型的分子病原学和免疫原性的比较研究

我国副鸡嗜血杆菌新血清型的分子病原学和免疫原性的比较研究

论文题目: 我国副鸡嗜血杆菌新血清型的分子病原学和免疫原性的比较研究

论文类型: 博士论文

论文专业: 预防兽医

作者: 卢冷轶

导师: 赵德明,苗得园

关键词: 副鸡嗜血杆菌,鸡传染性鼻炎,血凝素基因,免疫原性,三价疫苗

文献来源: 中国农业大学

发表年度: 2005

论文摘要: 2001年至2003年通过从不同地区的免疫失败鸡场分离到18株副鸡嗜血杆菌的血清型鉴定,有3株为B血清型,说明我国鸡传染性鼻炎的流行已经出现了新的特点。为解决临床上的问题,探讨免疫失败的原因,利用攻毒和血清HI抗体水平测定,观察不同A+C二价灭活疫苗二次免疫鸡群对B型分离株攻击的保护作用,结果表明:不同公司的疫苗的免疫效力有较大的差别,5个产品中有3个对A、C型保护较好,但不能对B型分离株的攻击提供有效的保护,且A、C型HI抗体阳性率、抗体滴度与对B型菌攻毒保护率无相关性,SD-1分离株可能是A型副鸡嗜血杆菌的变异株,其毒力已经有所加强。 鉴于B株流行和其他菌株毒力加强,为探求新菌株变异的分子病原学机制,本研究克隆了我国几个B型分离株和有代表性的A型株的血凝素基因,测定了其基因序列,从血凝素基因的水平上对国内的分离株进行了分析,并与已发表的标准株的序列进行了比较,结果表明,除Hp8株的基因与标准株极其类似外,SD-1、DL-1、TJ-1分离株的血凝素基因均多了一个氨基酸位点,与标准株的同源性也有所降低,进化树分析也完全属于一个新的进化支,说明我国的鸡传染性鼻炎的流行菌株在分子特性上出现了新特点,而多出的一个氨基酸位点,也极有可能是抗原性和菌株变化的重要原因。 为更好地控制B型菌的感染,为三价疫苗的研制提供依据,通过攻毒保护试验和HI抗体测定对我国不同地区的B型副鸡嗜血杆菌分离株进行了免疫原性的比较。分析结果表明:不同地区的分离株免疫原性存在一定的差异,在目前得到的分离株中,TJ-1免疫鸡对TJ-1和DL-1株的保护作用可达到90%和91.7%,对BJ-1株的保护率为63.6%,具有相对较好的保护作用,目前可以作为疫苗株使用。根据免疫原性的比较结果,选择抗原性较好的B型分离株TJ-1参与制备了鸡传染性鼻炎三价油乳剂灭活疫苗,并应用3批鸡传染性鼻炎三价油乳剂灭活疫苗进行了安全性和免疫效力检验,结果发现,超剂量注射疫苗鸡只食欲、精神未见异常,2周后观察,注射部位从外部观察未发现明显异常和病变。用该疫苗免疫后的鸡只对A型强致病力菌株的攻击保护率可达100%,对B型菌株的攻击保护率为94.4%,对C型高致病力菌株的攻击保护率为93.3%。采用阻断ELISA、HI和SPA对鸡群的抗体水平的评估表明该疫苗可激发产生较高的抗体水平。所有结果均表明,该疫苗具有良好的安全性和近期免疫效力。

论文目录:

摘要

Abstract

第一章 文献综述

1.1 病原学特征

1.2 流行病学特征

1.3 主要症状和病理变化

1.4 诊断要点

1.5 综合防治

第二章 我国新型副鸡嗜血杆菌的分离鉴定及流行状况分析研究

2.1 材料

2.2 方法

2.3 结果

2.4 讨论

第三章 鸡传染性鼻炎灭活疫苗对国内B型分离株保护力的比较研究

3.1 材料

3.2 方法

3.3 结果

3.4 讨论

第四章 国内新型副鸡嗜血杆菌分离株血凝素基因的克隆及序列分析

4.1 材料

4.2 方法

4.3 结果

4.4 讨论

第五章 B型分离株免疫原性的比较及疫苗免疫效力的研究

5.1 材料

5.2 方法

5.3 结果

5.4 讨论

第六章 结论与创新点

6.1 结论

6.2 创新点

主要参考文献

致谢

作者简介

发布时间: 2005-07-18

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