卫云(黑龙江省双鸭山市宝山区人民医院155100)
【关键词】尿液酶；临床检验；分析
【中图分类号】RA【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2013）42-0078-02
1尿N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶测定
1.1测定方法
1.1.1比色法根据反应底物不同，比色法NAG测定又分为PNP法和CNP法，国内已有试剂盒供应，该酶活性稳定，反应终止数小时后吸光度值不变；重复性好(日内CV2.33％；日间CV3.54％)；干扰因素很少，在普通分光光度计和自动生化分析仪上均可测定，结果与荧光分光光度计法高度相关(r＝0.997)，简便易行。同时测定随机尿的肌酐计算NAG／Cr，可排除由于尿液浓缩或稀释带来的影响。
1.1.2荧光光度法NAG可水解荧光底物4-甲基伞形酮N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷，生成游离的4-甲基伞形酮(4-MU)，后者在碱性条件下变构，受激发后产生荧光可用于仪器检测。以前该法仪器及试剂均靠进口，但近期已国产化。本法灵敏度高，不受尿色干扰，除服用产生荧光物质的药物外，无须设置空白反应管。该法要求条件仍较高。
1.2临床意义
1.2.1肾脏病变尿NAG酶活性增高是肾小管损害的敏感指标。各种原因所致肾小管损伤早期即可出现，肾小球病变尿NAG酶活性也增高，并与病变程度相关。因此在肾小球肾炎、肾盂肾炎、慢性‘肾功能不全、肾病综合征以及高血压、糖尿病、过敏性紫癜、多发性骨髓瘤等导致肾损害时，NAG活性都明显升高，以NAG-B最明显。尿NAG与清蛋白、β2微球蛋白、视黄醇结合蛋白等联合检测，对高血压、糖尿病、过敏性紫癜等并发肾损害具有早期诊断价值。
1.2.2肾移植排异反应2／3的肾移植病人在发生排异反应的前1～3天，NAG酶活性即可明显升高，该指标有利于早期发现排斥反应。
1.2.3上、下尿路感染的鉴别上尿路感染如肾盂肾炎时NAG酶活性升高；下尿路感染如膀胱炎、尿道炎时，酶活性无明显增高。
2尿γ-谷氨酰基转移酶测定
2.1测定方法
2.1.1对硝基苯胺比色法γ-GT可将γ-L-谷氨酰基对硝基苯胺之谷氨酰基转移到受体双甘肽分子上，生成γ-谷氨酰基双甘肽，同时生成有色的对硝基苯胺，在410nm比色测定生成的对硝基苯胺量。本法要求测定新鲜晨尿，为避免由于尿流速率带来的结果偏差，对明显浓缩或稀释尿建议测Cr。试剂为国际统一配方，各型自动分析仪按原程序进行速率法测定。尿液与试剂1：20为最适范围。还可用终点法进行手工测定。后者便于普及。本法的缺点是所用底物的溶解度低，配成溶液后在贮存过程中易析出结晶，影响测定结果。
2.1.2连续监测法1976年Persijn和Slik介绍了一种新的测定方法，采用γ-L-谷氨酰-3羧基-4-硝基苯胺(glucana)作底物，γ-GT将其谷氨酰基转移给双甘肽，同时生成3羧基-4-硝基苯胺(cana)。该产物在405nm吸收峰最高，用自动生化分析仪测定。该法底物溶解度高，可配成高浓度的溶液，在贮存过程中较为稳定。该法为中华医学检验学会推荐使用的γ-GT测定方法，目前已有试剂盒供应。
2.1.3重氮反应比色法本法主要用于血清γ-GT测定，原理与对硝基苯胺比色法相同，只是以L-谷氨酰-α-萘胺作底物，可以用手工法测定。不受实验室条件限制，但尚未用于尿酶测定。
2.2临床意义
2.2.1肾脏受损的早期诊断尿γ-GT是肾小管炎症的敏感指标，当肾脏局部的炎症累及近曲小管时，尿γ-GT增高，以自身免疫所引起的炎症反应(如SLE)最为显著，某些重金属所引起的中毒性肾损害，尿γ-GT也显著增高。相反，如果肾脏仅有组织结构上的异常或继发性损害，并无炎症反应(如多囊肾、糖尿病肾病等)，尿γ-GT并不增高。此外，同其它尿酶一样，尿γ-GT也可作为氨基糖甙类抗生素肾毒性的监测指标。注射造影剂可使尿γ-GT的排出暂时性增高。
2.2.2肾小球肾炎的疗效观察大多数肾小球肾炎病人尿γ-GT均增高，尿γ-GT增高的程度与肾炎的活动程度直接相关。当肾炎病人用皮质激素或免疫抑制剂治疗得以缓解时，尿γ-GT大多可恢复正常。
2.2.3肾移植排异反应观察指标肾移植后，随着肾功能的恢复，尿γ-GT的排出亦明显增高，1周左右尿γ-GT恢复正常水平。如果出现排异反应，尿γ-GT将再一次增高。
3尿淀粉酶测定
3.1测定方法
3.1.1碘-淀粉比色法(Somoggi法)线性＜400U／L。缺点是底物难以标准化，反应不呈零级反应。但因其简单、快速、灵敏、价廉而仍被国内广泛应用。
3.1.2氯-4硝基苯酚-α-麦芽糖三糖法(CNP-G3法)以染料和人工合成的可溶性底物相结合，因后者分子结构明确，稳定性好，近年来得到不断地发展。底物最初由Winn-Deen于1988年首次合成，已有成品试剂盒面市。因此本法有望成为推荐方法。线性：血清<1300U／L；尿液<2500U／L。
3.1.3对硝基麦芽七糖法(4NP-7G法)以对硝基苯麦芽七糖苷为底物，经α-淀粉酶催化，生成一系列寡糖，最终生成对硝基酚和葡萄糖。本法线性(25℃时，2000U／L)及稳定性均较好。国内已有试剂盒供应，但其组成及方法尚未统一。
3.2临床意义
3.2.1急性胰腺炎发病3～6h，血清AMY活性开始增高，20～30h达峰值，持续3～5天恢复正常；发病12～24h，尿AMY开始升高，3～10天后恢复正常。血清AMY同工酶P型升高。血清AMY主要用于急性胰腺炎的早期诊断，尿AMY主要用于病情观察。
3.2.2慢性胰腺炎稳定期，各项酶指标正常，急性发作时AMY及其P型同工酶均升高。
参考文献
[1]叶山东尿系列蛋白测定对糖尿病肾病的诊断价值中国临床保健杂志2004年第01期
[2]金大鸣.UF100型尿沉渣全自动检测仪评价［J］.中华医学检验杂志，1998,21(3):190.