吡格列酮抗动脉粥样硬化的作用及机制探讨

论文摘要

目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPAR-γ）激动剂吡格列酮对瘦素刺激的大鼠血管平滑肌细胞（VSMCs）增殖效应的影响及其作用机制。方法（1）以组织贴块法培养大鼠主动脉VSMCs,采用倒置相差显微镜和透射电镜观察的方法进行细胞鉴定;（2）分别使用0、12.5、25.0、50.0、100.0ng/ml瘦素作用于VSMCs24、48、72小时,以四甲基偶氮唑盐（MTT）法观察细胞的增殖情况;（3）100.0ng/ml瘦素作用于VSMCs72小时后,再分别加入1.0、10.0、100.0μmol/L的吡格列酮作用24小时,以MTT法观察细胞的生长情况;（4）提取细胞的总RNA和蛋白,分别用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和免疫印迹法（Western Blot）检测增殖细胞核抗原（PCNA）和瘦素受体（OB-R）mRNA及蛋白的表达水平。结果（1）与空白对照组相比,各浓度瘦素（12.5、25.0、50.0、100.0ng/ml）均可促进VSMCs增殖,其中50.0、100.0ng/ml瘦素作用于VSMCs 72小时后差异具有统计学意义（P＜0.05）,且该增殖作用呈现一定的时间和剂量依赖效应,以100.0ng/ml瘦素作用72小时后的细胞增殖率最大（22.4%）。（2）吡格列酮能抑制瘦素诱导的VSMCs的增殖效应,以浓度为100.0μmol/L时达最大抑制效应（P＜0.01）。（3）与空白对照组相比,100.0ng/ml瘦素作用于VSMCs72小时后,VSMCs PCNA及OB-R mRNA和蛋白的表达均明显升高,差异具有显著性（P均＜0.05）。（4）加入不同浓度的吡格列酮（1.0,10.0,100.0μmol/l）作用24小时后,与仅加瘦素组比较,可见VSMCs PCNA及OB-R mRNA和蛋白的表达量逐渐降低,其中以100.0μmol/l吡格列酮组作用最明显,差异具有统计学意义（P＜0.01）。结论高瘦素血症与动脉粥样硬化（AS）的发生、发展有相关性,吡格列酮可能通过降低OB-R和PCNA的表达抑制瘦素刺激的VSMCs增殖及表型转换,发挥一定的心血管保护作用。

论文目录

• 英文缩写注释
• 中文摘要
• 英文摘要
• 引言
• 参考文献
• 第一部分 吡格列酮对瘦素诱导的血管平滑肌细胞增殖的影响
• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 参考文献
• 第二部分 吡格列酮对瘦素诱导的血管平滑肌细胞PCNA及OB-R mRNA和蛋白表达水平的影响
• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 材料和方法
• 结果
• 讨论
• 参考文献
• 结论和展望
• 附录
• 致谢
• 综述及参考文献