论文摘要
背景外科手术中牵拉钳夹所致的血管内膜损伤,将加重缺血再灌注损伤,加速血栓形成,是直接影响胸心外科术后病变组织的血流灌注情况的关键。研究证实内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)可以诱导、调节组织缺血缺氧区血管新生和血管生成,刺激损伤血管内皮重新愈合,从而改善缺血器官功能。目的本实验根据目前比较公认的EPCs表面特异性分子标志(CD34+/CD133+/vWF+)从脐血中分离出EPCs,并在体外进行诱导分化,利用脐血在体外血管器官培养基础上观察了EPCs移植对去内膜血管段的修复过程。方法采用磁珠分选法及培养人脐血内皮祖细胞,分别采用流式细胞术及因子相关抗原免疫染色对培养细胞进行鉴定。牵拉钳夹损伤法制备去内膜脐动脉段,与EPCs共孵育7d后取内皮祖细胞移植组和对照组血管段,采用病理学方法、免疫组织化学和图像分析技术评价内皮祖细胞的修复效果。结果体外成功培养出人脐血内皮祖细胞,流式细胞术分析显示培养7d后,Ⅷ因子相关抗原(vWF)、白细胞分化抗原34(CD34)免疫染色阳性,流式细胞术显示我们的细胞表达EPCs最特异性早期抗原AC133 90%以上。人脐血EPCs与去内膜脐动脉共培育使之再内皮化,形成新内膜。结论利用脐血可成功培养出内皮祖细胞,体外培养内皮祖细胞可修复内皮损伤血管。
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