论文摘要
目的近年来,随着科学技术的迅猛发展,人们发现90%以上的疾病都与活性氧和自由基密不可分。轮叶党参（Codonopsis lanceolata）含有多酚、黄酮、皂苷、多糖等多种功能性成分和矿物质元素,营养价值高,深受人们喜爱。近几年来,国内外学者通过大量研究证实：轮叶党参具有保护肝脏、抗肿瘤、增强机体免疫力,抗氧化等作用,但尚未见发酵轮叶党参成分的抗氧化作用研究。本实验通过对发酵轮叶党参总皂苷、总多糖与未发酵轮叶党参总皂苷、总多糖体内外抗氧化作用的研究,筛选出抗氧化作用最强的功能性成分,为轮叶党参保健功能的开发利用提供理论依据。方法①轮叶党参切块,60℃烘干,粉碎,过80目筛。称取1000g轮叶党参粗粉末提取发酵（酵母菌）与未发酵轮叶党参总皂苷与总多糖。②体外实验,采用DPPH自由基清除能力、氧自由基吸收能力（ORAC）、细胞内抗氧化活性（CAA）实验,筛选出最优抗氧化能力的功能性成分。③体内实验,取小鼠60只,随机分空白对照组、模型组、阳性对照组、发酵轮叶党参总皂苷低、中、高剂量组,每组10只。发酵轮叶党参总皂苷低、中、高剂量组,分别按25、50、75 mg/kg·BW剂量灌胃给药,每天一次;空白对照组和模型组每天灌胃dH2O0.1mL/10mg·BW,阳性对照组每天灌胃Vit C10mg/kg·BW,连续30d。末次灌胃后,除空白对照组外其余5组禁食16h（过夜）,然后1次性灌胃,给予50%乙醇12mL/kg·BW,恢复小鼠自由摄食饲料和自来水。6h后小鼠摘眼球取血取上清液,采用酶联免疫吸附法（ELISA）,检测小鼠血清中超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽（GSH）的活性,蛋白羰基（PCO）、8-表氢氧异前列腺素（8-iso-PGF2a）的含量及血红素氧合酶-1（HO-1）、NADPH醌氧化还原酶（NQO-1）的表达。结果①DPPH自由基清除能力结果显示：发酵轮叶党参皂苷组清除DPPH.活性明显高于未发酵轮叶党参皂苷组与发酵、未发酵轮叶党参多糖组（P<0.05或P<0.01）发酵与未发酵轮叶党参多糖组DPPH-的清除能力比较,无显著性差异（P>0.05）。FCLS的EC50值为（109.52±0.05）μg/mL, N-FCLS的EC50值为（123.81±0.04）μg/mL,两者的EC50值均大于抗环血酸组（40.00±0.01）②氧自由基吸收能力结果显示：发酵轮叶党参皂苷组的氧自由基吸收能力明显高于未发酵轮叶党参皂苷组与发酵、未发酵轮叶党参多糖组（P<0.01）。发酵与未发酵轮叶党参多糖组氧自由基吸收能力比较,无显著性差异（P>0.05）。③细胞内抗氧化活性实验结果显示：发酵轮叶党参皂苷组与未发酵轮叶党参皂苷组各浓度剂量组的细胞荧光强度与空白组比较,差异具有统计学意义（P<0.05或P<0.01）；发酵、未发酵轮叶党参多糖150,200,250μg/mL浓度剂量组与空白组比较差异具有统计学意义（P<0.05）。FCLS抑制ROS氧化DFCH的能力最强（P<0.05）。④发酵轮叶党参皂苷低、中、高剂量组,GSH活性均显著高于模型组（P<0.05或P<0.01）。⑤发酵轮叶党参皂苷低、中、高剂量组,PCO、8-iso-PGF2a含量均显著低于模型组（P<0.05或P<0.01）。⑥发酵轮叶党参皂苷低、中、高剂量组,SOD、HO-1、NQO-1表达均显著高于模型组（P<0.05或P<0.01）。⑦发酵轮叶党参皂苷高剂量组与阳性对照组比较,PCO、8-iso-PGF2a含量、SOD、HO-1、NQO-1表达,差异均无统计学意义（P>0.05）结论①发酵、未发酵轮叶党参总皂苷与发酵、未发酵轮叶党参总多糖均具有抗氧化活性,发酵轮叶党参总皂苷抗氧化活性明显优于未发酵轮叶党参总皂昔,发酵、未发酵轮叶党参总多糖。②发酵轮叶党参总皂苷能够增强抗氧化酶活性,减少体内蛋白质氧化损伤、脂质氧化损伤,促进抗氧化蛋白表达。