论文摘要
目的:肺癌发病率及死亡率均居恶性肿瘤之首。确诊时大多数为中晚期肺癌,失去手术机会,体外照射联合化疗成为主要综合治疗方法,因正常肺组织耐受放射剂量所限使肿瘤局部控制率低,临床疗效欠佳,且带来严重副作用。目前放射性粒子组织间植入前列腺癌等实体瘤取得了一定疗效,应用于肺癌治疗的报道较少,特别联合化疗的研究鲜有报道。放射性粒源选择方面,最常用是125I粒子。与分次短时外照射相比,125I具有放射活度低,靶外剂量衰减迅速,周围正常组织损伤小,易防护,照射无间隙,生物效应高等独特优势。125I与化疗药物联合应用,在胰腺癌、头颈部肿瘤等实体瘤治疗中已证实具有降低局部复发,减少远处转移,周围正常组织损伤小等优点。应用于肺癌临床治疗则刚刚起步,尚处于探索阶段,需进一步研究。紫杉醇是目前对肺癌有效率较高的新药之一,其独特作用是使微管聚合,阻滞有丝分裂进行,产生大量G2/M期瘤细胞。而射线对G2/M期瘤细胞杀伤作用敏感,这使紫杉醇与放射性粒子配合治疗肿瘤具有合理性。本实验应用125I粒子植入联合紫杉醇治疗昆明小鼠Lewis肺癌移植瘤,研究其对肿瘤的杀伤效应及作用机制,为临床应用提供实验依据。方法:健康昆明小鼠56只,建成Lewis肺癌细胞昆明小鼠皮下移植瘤模型36只,随机分成对照组和治疗组,治疗组又分为紫杉醇组、125I组和紫杉醇与125I联合组,每组9只。在第1天,对照组小鼠腹腔注射生理盐水0.025ml/g,紫杉醇组腹腔注射紫杉醇0.5mg/g+生理盐水0.025ml/g,125I组植入125I粒子,处方剂量为120Gy,腹腔注射生理盐水0.025ml/g,联合组植入125I粒子,处方剂量为120Gy,注射紫杉醇0.5mg/g+生理盐水0.025ml/g。在第8天,对照组和125I组腹腔注射生理盐水0.025ml/g,紫杉醇组和联合组腹腔注射紫杉醇0.5mg/g+生理盐水0.025ml/g。每天观察小鼠的一般情况;隔日测量肿瘤体积;绘制肿瘤生长曲线;第30天比较治疗组的抑瘤率;进行石蜡切片HE染色,通过Wheeler放疗后肿瘤消退分级（Rectal Cancer Regression Grade,RCRG）标准进行移植瘤病理组织学反应评价;用流式细胞技术做肿瘤细胞凋亡率分析;免疫组织化学染色法检测肿瘤组织Caspase-3、Caspase-9蛋白表达水平。结果:1.肿瘤体积变化:对照组肿瘤体积逐渐增大,30天时体积为2456mm3;紫杉醇组也呈上升趋势,30天时体积为1451mm3;125I组和联合组肿瘤体积呈上升-下降趋势,10天左右开始逐渐下降,30天时体积分别为418mm3、210mm3,联合组下降最明显（P<0.05）。2.抑瘤率:治疗组的抑瘤率分别为43.51%、71.96%、88.97%,组间比较有显著差异（P<0.05）。3.病理组织学变化:治疗组与对照组、治疗组组间比较均有显著性差异（P<0.05）。4.肿瘤细胞凋亡率:各组凋亡率分别为9.25%、21.27%、41.96%、69.73%。各组间比较有显著差异（P<0.05）。5.免疫组化结果:各组Caspase-9蛋白表达率分别为13.23%、19.23%、25.51%、43.27%。对照组、紫杉醇组及125I组比较无显著差异性（P>0.05）,联合组与其他各组比较有显著差异（P<0.01）。各组Caspase-3蛋白表达率分别为12.14%、18.45%、27.23%、41.99%。对照组、紫杉醇组及125I组比较无显著差异性（P>0.05）,联合组与其他各组比较有显著差异（P<0.01）。结论:125I粒子植入联合紫杉醇对小鼠Lewis肺癌移植瘤有明显杀伤作用,其机制可能与激活Caspase-9蛋白的表达,启动Caspase-3诱导肿瘤细胞凋亡有关。