论文摘要
前言1989年，David Barker等报道了低出生体重与成人期一些慢性疾病的发病风险有关。自此，胎儿生长发育和成人慢性疾病间的关联性引起流行病学家极大关注。哺乳类胎儿在母亲子宫内的生长发育完全依赖于母体供给营养，因而母亲的营养和代谢情况直接影响着胎儿的生长发育。母亲孕期如果出现代谢紊乱高血糖症状，必然会影响到胎儿宫内和产后的生长发育。在我国，糖尿病和妊娠期糖尿病（Gestational diabetic mellitus，GDM）的发病率比较高，且呈现出逐年上升的趋势。国外对孕期高血糖的研究主要集中在畸胎和巨大儿方面，国内研究则侧重于孕期高血糖所致的不良妊娠结局上。孕期血糖异常对子代产后健康的长期效应国内报道很少。本实验通过建立孕期血糖异常大鼠模型，观察孕期高血糖大鼠其仔鼠的生后生长发育情况，为采取早期综合干预提供理论依据。材料和方法一、材料1、实验动物雄性Wistar大鼠18只，体重360～400g雌性Wistar大鼠36只，体重230～270g，购于中国医科大学实验动物中心。2、主要试剂链脲菌素（streptozotocin，STZ），血糖试纸条，胰岛素放射免疫试剂盒。二、方法1、妊娠期血糖异常大鼠模型的建立Wistar大鼠适应性喂养一周后，于下午4：30雌雄2：1合笼，次晨发现阴栓或检查阴道涂片发现精子者定为孕1天，单笼饲养。未孕鼠雌雄分开，于下午4：30再次合笼，如此循环，两周后未受孕的雌鼠弃之。把怀孕大鼠随机分为两组：STZ组24只，对照组7只。孕5天STZ组于禁食12h后腹腔注射新配置的2％STZ（40mg／kg体重），对照组注射等量的PH为4.5的0.1mol／L柠檬酸缓冲液。两组分别于孕13、16、19天晨起尾尖采血，测空腹血糖水平（禁食12h）。STZ组中孕鼠3次血糖值只要有1次大于5.55mmol／L就归为实验组，3次血糖值均小于5.55mmol／L的剔除。动物室温度22±3℃，相对湿度45％～55％，自由饮水摄食。记录孕鼠孕1天和孕21天体重，仔鼠于分娩后12h内称重，以后每周称重。仔鼠3w识性别，4w断乳，雌雄分笼饲养，每笼2～3只，喂养至12w龄。2、仔鼠早期生理发育指标检查张耳、出牙、开眼3、仔鼠反射发育指标检查断崖回避反射、平面翻正反射、负向趋地性反射4、学习记忆测定跳台实验5、标本采集与处理（1）血清采集仔鼠分别在6w末和12w末，禁食12h后，于下腔静脉采血10ml，处死。采集的血样在室温下静置2h后，以3000r／min离心20min，分离血清，密封，于-70℃深冻冰箱保存，待测。（2）各脏器取材剖开腹腔，分离肝脏和肾脏，称重并记录。沿颅缝剪开，暴露大脑，迅速取出大脑，称重并记录。6、指标的检测（1）空腹血糖（FBS）水平测定：邻甲苯胺法（2）空腹血清胰岛素（FINS）水平测定：放射免疫分析法7、统计分析采用SPSS11.5软件包，数据结果用（?）±s表示，两组行为指标达标率的比较采用卡方检验，其它指标用t检验。实验结果1、孕期血糖异常大鼠模型建立（1）两组母鼠孕期血糖水平孕13、16、19天实验组孕鼠平均血糖水平明显高于对照组（P＜0.05）；并且实验组孕鼠血糖水平随孕龄有明显增高现象。（2）两组母鼠孕初体重、孕期体重增量及产仔数比较两组母鼠孕初的体重和产仔数差异没有统计学意义（P＞0.05），但实验组的母鼠整个孕期体重增量显著小于对照组，具有统计学意义（P＜0.05）。2、孕期血糖异常对仔鼠身体发育的影响（1）两组仔鼠体重变化情况从出生到12w实验组仔鼠体重一直明显低于对照组，具有统计学意义（P＜0.05）；两组仔鼠体重随周龄均呈上升趋势。（2）两组仔鼠6w、12w各脏器体重比6w龄和12w龄时两组仔鼠的肝体比、肾体比和脑体比差异均无统计学意义（P＞0.05）。3、孕期血糖异常对仔鼠神经系统发育影响（1）两组仔鼠早期生理发育和反射发育的比较张耳、出牙、开眼和断崖回避反射两组的达标率差异无统计学意义（P＞0.05）。负向趋地反射和平面翻正反射实验组达标率明显低于对照组（P＜0.05）。（2）两组仔鼠学习和记忆能力的比较实验组雌性仔鼠学习能力表现差于对照组（P＜0.05），记忆能力两组间差异没有统计学意义（P＞0.05）。实验组雄性仔鼠在学习能力和记忆能力与对照组比较均无统计学意义（P＞0.05）。4、孕期血糖异常对仔鼠糖代谢的影响（1）两组仔鼠不同时期FBS、FINS水平的比较6w龄时空腹血糖和胰岛素水平两组间差异都没有统计学意义（P＞0.05）；12w龄时实验组的血糖水平以及胰岛素水平都显著高于对照组（P＜0.05）。结论（1）母鼠孕期高血糖影响仔鼠宫内发育，导致出生体重较低，并持续到成年期。（2）母鼠孕期高血糖不影响仔鼠的生理发育（张耳、开眼、出牙），但是对仔鼠的反射发育和雌鼠的学习能力有一定影响。（3）母鼠孕期高血糖其仔鼠在成年期出现了糖代谢异常。