血小板膜糖蛋白脂质体的研究

论文摘要

血小板的主要生理功能是参与止血与凝血,临床上血小板在骨髓移植、白血病、肿瘤等病人中大量应用。目前,血小板保存方法还有诸多缺陷,且血小板制剂供应紧缺。所以,现在迫切需要研究开发新型的血小板代用品。 本研究主要分为以下四部分: 第一部分以差速离心法分离血小板,1%Triton溶解法制备血小板溶液,麦胚凝集素亲和层析纯化糖蛋白,制得了血小板膜糖蛋白。第二部分体外鉴定血小板膜糖蛋白的生物活性。经测定血小板溶液纯化前后对Ristocetin和ADP诱导的血小板聚集有抑制作用。第三部分采用逆相蒸发法制备血小板膜糖蛋白-脂质体。所制得的脂质体表面荷负电,粒径为266+23nm（n=10）,包封率为74.0%±5.8%（n=6）。第四部分用血小板体外聚集方法鉴定糖蛋白-脂质体的生物活性。糖蛋白-脂质体促进血小板聚集的最优浓度为140μg/ml;140μg/ml糖蛋白脂质体在Ristocetin诱导下能促进不同浓度的血小板聚集。 本研究建立了一种简便快速的血小板溶液的制备方法;优化了凝集素亲和层析纯化糖蛋白的方法;制备了具有拟血小板聚集活性的糖蛋白-脂质体。本制剂一定程度上解决了血小板制剂存在的一些问题,有很好的临床应用前景和巨大的经济效益。

论文目录

• 缩略词表
• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 第一部分 血小板膜糖蛋白的分离鉴定
• 1.材料
• 1.1 主要试剂
• 1.2 主要仪器
• 1.3 主要试液的配方
• 2.方法
• 2.1 血小板破碎方法
• 2.2 血小板膜糖蛋白的纯化
• 2.3 血小板膜糖蛋白的鉴定
• 3.结果
• 4.讨论
• 第二部分 血小板膜糖蛋白体外活性鉴定
• 1.试剂与仪器
• 2.方法
• 3.结果
• 4.讨论
• 第三部分 血小板膜糖蛋白脂质体的制备
• 1.材料
• 2.脂质体制备方法
• 3.脂质体质量评价
• 4.结果
• 5.讨论
• 第四部分 血小板膜糖蛋白脂质体活性鉴定
• 1.试剂与仪器
• 2.方法
• 3.结果
• 4.讨论
• 总结
• 参考文献
• 致谢
• 申请专利及论文发表情况
• 附录：专利与发表论文