论文摘要
目的乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一。众所周知，半数以上的乳腺癌是激素依赖性肿瘤，雌激素是乳腺癌发生发展的重要刺激因素，而作为乳腺癌治疗的重要组成部分内分泌疗法的主要机制就是通过降低或消除体内的雌激素水平来阻止乳腺癌的生长和繁殖，最终达到控制肿瘤生长的目的。乳腺癌内分泌治疗药物的靶点之一为雌激素受体，因此，这决定了它治疗的局限性，即仅对雌激素受体阳性的乳腺癌细胞疗效确切，而对雌激素受体阴性的乳腺癌几乎无效。丹参酮ⅡA作为中药丹参酮的有效脂溶性成分，大量的实验研究和临床试验表明其具有抗肿瘤的作用。近年来有学者报道，丹参酮ⅡA体外对雌激素受体阳性人乳腺癌细胞和体内对雌激素受体阴性的乳腺癌均有抑制作用，为乳腺癌治疗研究提供一条新的思路。本研究拟通过体外实验观察丹参酮ⅡA对雌激素受体阳性和雌激素受体阴性的乳腺癌细胞的作用差异以及其对两种乳腺癌细胞株ER表达的影响，并以内分泌治疗经典药他莫西芬作为阳性对照，并探讨其内分泌作用机制的可能性。方法体外培养两种人乳腺癌细胞：雌激素受体阳性细胞株MCF-7和雌激素受体阴性细胞株MDA-MB-231。用不同浓度的丹参酮ⅡA和他莫西芬分别处理两种细胞，而后应用细胞毒性实验（MTT比色法），Brdu掺入试验，免疫组化测ER、PR、p53、CerbB-2及Bcl-2的表达，流式细胞分析两种细胞经过不同处理后的增殖和凋亡改变。结果细胞毒性实验结果显示，丹参酮ⅡA对雌激素受体阳性乳腺癌细胞MCF-7和雌激素受体阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231均有明显抑制作用，且这种抑制作用在两系细胞均呈剂量-时间依赖关系。丹参酮ⅡA作用于两种细胞的50％的细胞抑制药物浓度IC50均为0．25ug／ml；阳性对照药他莫西芬表现为对雌激素受体阳性乳腺癌细胞MCF-7有较为明显的抑制作用，但其作用无确切的剂量-时间依赖关系，且与实验组丹参酮ⅡA比较，丹参酮ⅡA对MCF-7的抑制作用优于他莫西芬，差异具有统计学意义（P＜0．05）；他莫西芬对雌激素受体阴性乳腺癌细胞抑制作用不明显，与丹参酮ⅡA比较，丹参酮ⅡA组明显优于TAM（P＜0．001）。进一步比较丹参酮ⅡA对ER阳性乳腺癌细胞MCF-7和ER阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231的抑制作用，差异无统计学意义（P＞0．05）。Brdu掺入实验结果显示，MCF-7空白对照组、他莫西芬组、丹参酮ⅡA组的平均Brdu标记率分别为54．8±2．3％、40．8±6．9％和23．8±4．3％，各组之间两两比较均有统计学差异（P＜0．05）；而MDA-MB-231上述三组的平均Brdu标记率分别为43．9±5．1％、37．9±3．9％和21．1±2．8％，组间两两比较均有差异（P＜0．05）。细胞免疫组织化学结果显示，MDA-MB-231经0．25ug／ml丹参酮ⅡA处N72h后ER，PR表达呈弱阳性，阳性强度平均评分分别为0．263±0．069和0．121±0．030，较空白对照组的阴性表达（阳性强度平均评分为0和0．043±0．069）有统计学差异（P＜0．05）；此外，丹参酮ⅡA处理MCF-7和MDA-MB-231两种细胞后，其p53表达均上调（TanⅡA处理组阳性平均评分分别为0．376±0．065和1．233±0．132，空白对照组分别为0．357±0．086和0．150±0．030），且MCF-7细胞上调明显，为强阳性表达；丹参酮ⅡA处理MCF-7后，其CerbB-2表达较空白对照组和他莫西芬组表达略有增强（P＜0．05），而他莫西芬处理MCF-7后，表达无显著变化（P＞0．05）。丹参酮ⅡA和他莫西芬分别处理MDA-MB-231后，较空白对照组均无明显差异（P＞0．05）。丹参酮ⅡA处理MCF-7细胞后，其Bcl-2的表达较空白对照组无明显变化（P＞0．05），他莫西芬处理后其表达较前两组略增强（P＜0．05），而丹参酮ⅡA处理MDA-MB-231后，其Bcl-2的表达无明显变化，他莫西芬处理后Bcl-2的表达较前两组略有降低（P＜0．05）。流式细胞检测显示，经丹参酮ⅡA 0．25ug／ml，他莫西芬10umol／L分别处理两种细胞72h后，丹参酮ⅡA组MCF-7和MDA-MB-231的平均凋亡分数分别为29．9±5．5％和23．3±5．9％；他莫西芬组分别为13．4±1．1％和9．5±6．8％，而空白对照组分别为6．7±2．8％和6．1±5．0％，且丹参酮ⅡA组处理MCF-7后其凋亡分数与空白对照具有明显差异（P＜0．001），其促凋亡作用优于他莫西芬组，差异具有统计学意义（P＜0．05）；MDA-MB-231细胞空白对照组的凋亡分数与他莫西芬组比较无差异（P＞0．05），其丹参酮ⅡA处理组与他莫西芬组及与空白对照组之间比较差异均有统计学意义（P＜0．05）。结论丹参酮ⅡA体外对ER阳性乳腺癌细胞MCF-7和ER受体阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231均有明显抑制作用，其作用效力呈剂量-时间依赖关系，且其对两种细胞株的抑制作用比较无显著差异（P＞0．05）；但其对两种乳腺癌细胞抑制作用均优于阳性对照药他莫西芬；丹参酮ⅡA可上调雌激素受体阴性细胞MDA-MB-231的ER，PR表达水平；丹参酮ⅡA可上调ER阳性乳腺癌细胞MCF-7和ER受体阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231的p53表达水平；丹参酮ⅡA可轻度上调ER阳性乳腺癌细胞MCF-7的CerbB-2水平；丹参酮ⅡA处理两种细胞后其S期细胞均显著减少，能够促进肿瘤细胞凋亡。
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- [2].叶酸修饰载丹参酮ⅡA纳米结构脂质载体的制备及其理化表征[J]. 天津中医药大学学报 2020(01)
- [3].丹参酮ⅡA药理作用的研究进展[J]. 吉林医药学院学报 2020(03)
- [4].丹参酮ⅡA药理作用的研究进展[J]. 生物学杂志 2016(06)
- [5].丹参酮Ⅱ_A白蛋白纳米粒的制备及其体外抗肿瘤药效研究[J]. 中国中药杂志 2017(04)
- [6].高效液相色谱法测定慢肝福丸中丹参酮Ⅱ_A的含量[J]. 中国合理用药探索 2017(02)
- [7].丹参酮ⅡA磺酸钠用于治疗高龄冠心病的疗效分析[J]. 中西医结合心血管病电子杂志 2016(35)
- [8].丹参酮ⅡA磺酸钠用于治疗高龄冠心病的疗效分析[J]. 中西医结合心血管病电子杂志 2017(14)
- [9].丹参酮ⅡA干预乳腺癌的研究进展[J]. 中医药导报 2017(14)
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- [11].高效液相色谱法检测蒙药冠心七味片中丹参酮Ⅱ_A的含量探讨[J]. 世界最新医学信息文摘 2016(34)
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- [13].丹参酮ⅡA固体脂质纳米粒缓释凝胶骨架片的制备[J]. 中国新药杂志 2015(05)
- [14].丹参酮ⅡA联合尼莫通治疗外伤性脑梗死的疗效研究[J]. 中西医结合心血管病电子杂志 2014(18)
- [15].丹参酮ⅡA抗动脉粥样硬化作用的基础研究[J]. 中国中医药信息杂志 2015(06)
- [16].丹参酮ⅡA磷脂复合物的制备及鉴别[J]. 南京中医药大学学报 2015(03)
- [17].丹参酮Ⅱ_A的药理作用及治疗应用研究进展[J]. 神经药理学报 2014(05)
- [18].丹参酮ⅡA抑制乳腺癌细胞转移的机制[J]. 黑龙江医学 2015(11)
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- [20].高效液相色谱法测定云南不同产地大紫丹参中丹参酮Ⅱ_A的含量[J]. 中药材 2013(10)
- [21].丹参酮Ⅱ_A药理作用研究进展[J]. 中国药业 2020(21)
- [22].丹参酮ⅡA对脑微血管内皮细胞损伤的防护作用[J]. 中医学报 2019(12)
- [23].丹参酮Ⅱ_A脂化乳的制备及其稳定性研究[J]. 现代药物与临床 2017(01)
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- [28].高效液相色谱法测定丹参片中丹参酮Ⅱ A含量的方法[J]. 中国现代药物应用 2017(12)
- [29].丹参酮ⅡA对肉鸡腹水综合征中肾功能的影响[J]. 江西畜牧兽医杂志 2017(04)
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