论文题目: 脐血干细胞移植体内诱导分化为肝细胞的实验研究
论文类型: 博士论文
论文专业: 外科学
作者: 黄韬
导师: 李波
关键词: 脐血干细胞,分化,羟乙基淀粉分离法,分离法,动物模型
文献来源: 四川大学
发表年度: 2005
论文摘要: 目的 通过脐血干细胞移植在体内诱导分化为肝细胞的实验研究,进一步为脐血干细胞向肝细胞的分化提供证据,证实脐血干细胞的可塑性,为将脐血干细胞移植应用于治疗终末期肝病的研究奠定基础。 方法 ① 使用采血袋法采集脐血标本,分别采用改良HES(羟乙基淀粉)沉降分离法和Ficoll分离法两种方法分离脐血干细胞,比较分离前后有核细胞(nuclear cell,NC)数、分离后CD34+细胞数、分离后有核细胞回收率及台盼蓝拒染率,了解分离后有核细胞的数量和质量,为脐血移植创造条件。 ② 选用BALB/C裸鼠,将其随机分成实验组和对照组,实验组再根据输注有核细胞数的不同分成A、B、C三组。采用Co60治疗仪γ-射线对实验组和对照组进行亚致死剂量350cGy照射,照射后3小时内在无菌条件下由裸鼠尾静脉输入分离的人新鲜脐血有核细胞。实验A、B、C三组分别输入NC1.0×107个/只、2.0×107个/只、3.0×107个/只,对照组经尾静脉注入等体积无菌生理盐水。移植后第1、2、3、4和8周分别检测实验组和对照组外周血白细胞,移植后第4、6和8周通过流式细胞仪检测外周血人源性CD34+和CD45+细胞水平,了解人鼠细胞嵌合情况。移植后一个月对实验组A、B和对照组裸鼠分别按0.4ml/kg注射用玉米油稀释到100μl的四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl4),实验组C注射等体积生理盐水。通过CCl4造成肝脏损伤,诱导脐血干细胞归巢到
论文目录:
中文摘要
英文摘要
1 前言
1.1 研究背景
1.2 研究目的
2 材料与方法
2.1 材料
2.1.1 主要实验仪器
2.1.2 主要试剂及其配制
2.2 方法
2.2.1 脐血干细胞的分离
2.2.2 人鼠嵌合裸鼠模型的建立
2.2.3 脐血干细胞体内分化为肝细胞的检测
2.3 统计分析
3 结果
3.1 脐血干细胞的分离
3.2 脐血移植体内分化为肝细胞的人鼠嵌合裸鼠模型
3.3 免疫组化检查情况
3.4 RT-PCR结果
4 讨论
4.1 脐血采集和脐血干细胞的分离
4.2 脐血移植体内分化肝细胞人鼠嵌合裸鼠模型的建立
4.3 脐血干细胞体内分化为肝细胞
5 结论
参考文献
综述:干细胞向肝细胞分化的研究进展
参考文献
缩略词简表
致谢
发布时间: 2005-11-09
参考文献
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