本文主要研究内容
作者刘静,任志广,王铁成,李元果,孙伟洋,冯娜,秦川,高玉伟,夏咸柱(2019)在《通用H5N1亚型禽流感病毒样颗粒疫苗的制备》一文中研究指出:目的高致病性H5N1亚型流感病毒可感染人,并不断衍生出多个新的基因谱系,存在着大规模流行的可能性。我国现有的商品化疫苗无法对不同谱系的H5N1流感病毒感染提供有效的保护。病毒样颗粒(Virus-like particles,VLPs)疫苗具有良好的免疫原性和安全性,成为近年研究的热点。本研究旨在建立H5亚型禽流感病毒通用型病毒样颗粒疫苗的制备方法。方法将优化的H5N1 A/meerkat/Shanghai/SH-1/2012(clade 2.3.2.1)亚型流感病毒的HLHA(HA stem)/5M2e(5个M2e)/HL5M2e(5M2e替代HA的头部嵌入HLHA)、NP基因和M1基因分别插入pFastBacDual载体,得到相应的重组供体。然后将重组供体转化至含Bacmid的DH10Bac感受态细胞中,获得含有目的基因的重组杆粒。结果酶切和PCR鉴定表明成功构建了含目的基因的重组杆粒Bacmid-(HLHA/5M2e/HL5M2e、NP、M1)。将重组杆粒转染Sf9昆虫细胞,IFA试验和Western blot试验皆证实,优化的HLHA(HA stem)/5M2e/HL5M2e、NP基因和M1基因编码的蛋白均获得表达。透射电子显微镜观察VLPs转染Sf9细胞上清的浓缩液中,有球形结构和100 nm左右典型VLPs存在。结论在Sf9昆虫杆状病毒表达系统中成功表达H5N1 A/meerkat/Shanghai/SH-1/2012(clade 2.3.2.1)亚型禽流感病毒的HLHA(HA stem)/5M2e/HL5M2e、NP和M1蛋白,并组装成3种VLPs,为进一步研究流感病毒的VLPs疫苗奠定了基础。
Abstract
mu de gao zhi bing xing H5N1ya xing liu gan bing du ke gan ran ren ,bing bu duan yan sheng chu duo ge xin de ji yin pu ji ,cun zai zhao da gui mo liu hang de ke neng xing 。wo guo xian you de shang pin hua yi miao mo fa dui bu tong pu ji de H5N1liu gan bing du gan ran di gong you xiao de bao hu 。bing du yang ke li (Virus-like particles,VLPs)yi miao ju you liang hao de mian yi yuan xing he an quan xing ,cheng wei jin nian yan jiu de re dian 。ben yan jiu zhi zai jian li H5ya xing qin liu gan bing du tong yong xing bing du yang ke li yi miao de zhi bei fang fa 。fang fa jiang you hua de H5N1 A/meerkat/Shanghai/SH-1/2012(clade 2.3.2.1)ya xing liu gan bing du de HLHA(HA stem)/5M2e(5ge M2e)/HL5M2e(5M2eti dai HAde tou bu qian ru HLHA)、NPji yin he M1ji yin fen bie cha ru pFastBacDualzai ti ,de dao xiang ying de chong zu gong ti 。ran hou jiang chong zu gong ti zhuai hua zhi han Bacmidde DH10Bacgan shou tai xi bao zhong ,huo de han you mu de ji yin de chong zu gan li 。jie guo mei qie he PCRjian ding biao ming cheng gong gou jian le han mu de ji yin de chong zu gan li Bacmid-(HLHA/5M2e/HL5M2e、NP、M1)。jiang chong zu gan li zhuai ran Sf9kun chong xi bao ,IFAshi yan he Western blotshi yan jie zheng shi ,you hua de HLHA(HA stem)/5M2e/HL5M2e、NPji yin he M1ji yin bian ma de dan bai jun huo de biao da 。tou she dian zi xian wei jing guan cha VLPszhuai ran Sf9xi bao shang qing de nong su ye zhong ,you qiu xing jie gou he 100 nmzuo you dian xing VLPscun zai 。jie lun zai Sf9kun chong gan zhuang bing du biao da ji tong zhong cheng gong biao da H5N1 A/meerkat/Shanghai/SH-1/2012(clade 2.3.2.1)ya xing qin liu gan bing du de HLHA(HA stem)/5M2e/HL5M2e、NPhe M1dan bai ,bing zu zhuang cheng 3chong VLPs,wei jin yi bu yan jiu liu gan bing du de VLPsyi miao dian ding le ji chu 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自中国病原生物学杂志的刘静,任志广,王铁成,李元果,孙伟洋,冯娜,秦川,高玉伟,夏咸柱,发表于刊物中国病原生物学杂志2019年07期论文,是一篇关于流感病毒论文,基因优化论文,病毒样颗粒论文,中国病原生物学杂志2019年07期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自中国病原生物学杂志2019年07期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。
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