本文主要研究内容
作者刘子欢,赵丹,常梦颖,张雅昆,徐畅,陆秀君,郭巍（2019）在《美国白蛾氨肽酶N的基因克隆表达及与苏云金杆菌3种毒素蛋白的结合特性分析》一文中研究指出：美国白蛾（Hyphantria cunea）是桑树的重要害虫。为明确苏云金杆菌（Bacillus thuringiensis）杀虫晶体蛋白对该虫的作用机制,利用已知昆虫氨肽酶N基因序列设计引物,以美国白蛾中肠cDNA为模板,利用RACE-PCR技术获得美国白蛾中肠氨肽酶N基因hcapn1全长序列（GenBank登录号:KP053647）。该基因开放阅读框为3 000 bp,编码999个氨基酸,预测蛋白质的分子质量和等电点分别为113.14 kD和4.85。设计去信号肽引物PCR扩增获得hcapn1基因序列,构建原核重组表达载体pET30a-hcapn1,诱导表达的HcAPN1重组蛋白约110 kD。将苏云金杆菌Cry1Ac、Cry2Ab33和Cry9Ea6原毒素经胰蛋白酶消化后与HcAPN1重组蛋白分别进行体外配体印迹试验,发现HcAPN1重组蛋白与Cry9Ea6结合,而不与Cry2Ab33、Cry1Ac发生特异结合,推测HcAPN1可能为Cry9Ea6在美国白蛾中肠的受体蛋白。分别设计引物扩增HcAPN1蛋白2个结构域Asp34～Asp527和Leu563～Gln925的编码序列,在大肠埃希菌中表达获得62 kD和48 kD 2种重组蛋白,体外结合试验显示Cry9Ea6与HcAPN1的结合发生在Leu563～Gln925之间。研究结果为深入理解苏云金杆菌Cry9Ea6蛋白对美国白蛾的杀虫机制提供了基础数据。
Abstract
mei guo bai e （Hyphantria cunea）shi sang shu de chong yao hai chong 。wei ming que su yun jin gan jun （Bacillus thuringiensis）sha chong jing ti dan bai dui gai chong de zuo yong ji zhi ,li yong yi zhi kun chong an tai mei Nji yin xu lie she ji yin wu ,yi mei guo bai e zhong chang cDNAwei mo ban ,li yong RACE-PCRji shu huo de mei guo bai e zhong chang an tai mei Nji yin hcapn1quan chang xu lie （GenBankdeng lu hao :KP053647）。gai ji yin kai fang yue dou kuang wei 3 000 bp,bian ma 999ge an ji suan ,yu ce dan bai zhi de fen zi zhi liang he deng dian dian fen bie wei 113.14 kDhe 4.85。she ji qu xin hao tai yin wu PCRkuo zeng huo de hcapn1ji yin xu lie ,gou jian yuan he chong zu biao da zai ti pET30a-hcapn1,you dao biao da de HcAPN1chong zu dan bai yao 110 kD。jiang su yun jin gan jun Cry1Ac、Cry2Ab33he Cry9Ea6yuan du su jing yi dan bai mei xiao hua hou yu HcAPN1chong zu dan bai fen bie jin hang ti wai pei ti yin ji shi yan ,fa xian HcAPN1chong zu dan bai yu Cry9Ea6jie ge ,er bu yu Cry2Ab33、Cry1Acfa sheng te yi jie ge ,tui ce HcAPN1ke neng wei Cry9Ea6zai mei guo bai e zhong chang de shou ti dan bai 。fen bie she ji yin wu kuo zeng HcAPN1dan bai 2ge jie gou yu Asp34～Asp527he Leu563～Gln925de bian ma xu lie ,zai da chang ai xi jun zhong biao da huo de 62 kDhe 48 kD 2chong chong zu dan bai ,ti wai jie ge shi yan xian shi Cry9Ea6yu HcAPN1de jie ge fa sheng zai Leu563～Gln925zhi jian 。yan jiu jie guo wei shen ru li jie su yun jin gan jun Cry9Ea6dan bai dui mei guo bai e de sha chong ji zhi di gong le ji chu shu ju 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自蚕业科学的刘子欢,赵丹,常梦颖,张雅昆,徐畅,陆秀君,郭巍，发表于刊物蚕业科学2019年01期论文，是一篇关于美国白蛾论文,氨肽酶论文,蛋白论文,配体印迹论文,蚕业科学2019年01期论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自蚕业科学2019年01期论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
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