铕荧光探针及其在药物和DNA分析中的应用

论文摘要

铕（Eu）和铽（Tb）为代表的稀土配合物以其窄的发射光谱、较大的Stokes位移、长荧光寿命、荧光稳定等许多优越特性,已成为目前分析化学领域中十分活跃的研究课题。本研究采用时间分辨荧光法,以稀土铕（Ⅲ）作为荧光探针,建立了一种简单而灵敏的测定吡哌酸（PPA）含量的新方法。吡哌酸和铕（Ⅲ）配合后,作为配体的吡哌酸吸收紫外光并将能量传递给铕,然后发射铕离子的特征荧光。详细研究了Eu3+-PPA配合物体系的荧光光谱特征及实验条件对体系荧光强度的影响,配合物荧光体系的最大激发和发射波长分别为274 nm和616 nm,在pH 8.2的Tris-HCl缓冲溶液中,加入适量阴离子表面活性剂十二烷基硫酸钠（SDS）后,体系荧光强度大大增强,吡哌酸溶液在5.00×10-8～5.00×10-6 mol/L浓度范围内与荧光强度呈良好的线性关系,方法的检出限为2×10-8 mol/L,测定精度RSD为0.6%（2.00×10-6 mol/L, n=11）。该方法可用于吡哌酸药片含量及尿液中痕量吡哌酸的测定,药片测定结果与药典方法基本一致,尿样中加标回收率令人满意。脱氧核糖核酸（deoxyribonucleic acid, DNA）的天然荧光很微弱,使得直接利用其荧光进行研究受到很大限制。吡哌酸与铕（Ⅲ）反应生成的配合物发射Eu3+的特征荧光,而DNA的加入又可使其荧光强度大大增强。本研究采用时间分辨荧光法,以Eu3+-PPA作为荧光探针,使其与鲱鱼精DNA相互作用,实验发现荧光强度随鲱鱼精DNA的浓度的增加而增强,可以定量检测鲱鱼精DNA的含量。鲱鱼精DNA的浓度在0.1～6.0mg/L范围内与荧光强度呈良好的线性关系,方法的检出限为0.03 mg/L,对浓度为4.0mg／L的鲱鱼精DNA平行测定11次的相对标准偏差为0.3%,已成功用于合成样品中鲱鱼精DNA的测定。

论文目录

• 中文摘要
• ABSTRACT
• 第1章 绪论
• 1.1 稀土元素概述
• 1.2 稀土的发光机理及荧光性质
• 1.3 稀土元素的配位体
• 1.3.1 有机配位体
• 1.3.2 超分子大环配位体
• 1.3.3 药物分子配位体
• 1.3.4 生物分子配位体
• 1.4 荧光产生的理论基础
• 1.4.1 荧光的发现及发展
• 1.4.2 荧光产生的理论基础
• 1.4.3 荧光激发光谱和发射光谱
• 1.4.4 荧光强度和荧光寿命
• 1.5 时间分辨荧光分析法
• 1.5.1 时间分辨荧光分析法的检测原理
• 1.5.2 时间分辨荧光分析法的特点及应用
• 1.6 表面活性剂的作用
• 1.7 本项研究的工作思路和意义
• 第2章 铕（Ⅲ）荧光探针时间分辨荧光法测定吡哌酸
• 2.1 实验原理
• 2.2 实验部分
• 2.2.1 仪器与试剂
• 2.2.2 实验方法
• 2.3 结果与讨论
• 2.3.1 紫外吸收光谱
• 2.3.2 时间分辨荧光激发和发射光谱
• 2.3.3 普通荧光与时间分辨荧光的对比
• 2.3.4 铕-吡哌酸配位比的测定
• 2.3.5 反应条件的选择
• 2.3.6 共存离子对体系荧光强度的影响
• 2.3.7 标准曲线及检出限
• 2.3.8 样品测定及回收率实验
• 2.3.9 尿样测定
• 2.4 小结
• 第3章 铕-吡哌酸时间分辨荧光法检测DNA含量
• 3.1 实验原理
• 3.2 实验部分
• 3.2.1 仪器与试剂
• 3.2.2 实验方法
• 3.3 结果与讨论
• 3.3.1 时间分辨荧光激发和发射光谱
• 3.3.2 时间分辨荧光与普通荧光的对比
• 3.3.3 荧光寿命的测定
• 3.3.4 反应条件的选择
• 3.3.5 干扰实验
• 3.3.6 标准曲线与检出限
• 3.3.7 合成样品的测定
• 3.4 小结
• 第4章 结论与研究展望
• 4.1 结论
• 4.2 研究展望
• 参考文献
• 致谢
• 攻读硕士学位期间发表的学术论文目录