伪狂犬病病毒主要毒力基因功能的研究

论文题目: 伪狂犬病病毒主要毒力基因功能的研究

论文类型: 博士论文

论文专业: 预防兽医学

作者: 阳爱国

导师: 郭万柱

关键词: 伪狂犬病,毒力基因,增殖,致病性,免疫原性,基因功能

文献来源: 四川农业大学

发表年度: 2005

论文摘要: 本试验通过研究PRV主要毒力基因缺失后对病毒在细胞中的增殖规律、猪的致病性、组织器官内的分布定植、免疫原性等方面影响,反向论证了伪狂犬病病毒TK、gI和gE等主要毒力基因的功能。 1.TK基因 TK基因缺失毒株D1和野毒Fa株的细胞培养特性发现:D1株对Vero细胞、IBRS2细胞、Marc145细胞、MDBK细胞、ST细胞均较敏感,其增殖均与野毒Fa株相似。对照组PRV Fa强毒攻毒可导致仔猪大脑、小脑、三叉神经、心脏、肝脏、肺脏、肾脏、淋巴结、扁桃体等9个器官发生明显病变;D1组PRV Fa强毒攻毒可导致肝脏、肺脏、淋巴结、扁桃体4个组织器官发生明显病变。PRV Fa对照组在10个组织中均检测出PRV;而D1免疫组用强毒攻毒后,在大脑、小脑、肺脏中未检测出PRV,其余组织均检测出PRV。结果表明:(1)TK基因是PRV复制的非必需基因,TK基因失活不影响病毒的正常增殖。(2)TK基因是主要毒力基因,其缺失引起PRV毒力丧失或极显著地降低;在中枢神经对病毒的复制起主要作用。TK基因与PRV在大脑、小脑、三叉神经、肾脏、心脏的定植和毒力相关;(3)TK基因对病毒嗜神经性,缺失后有抗潜伏感染的特性。 2.gE/gI基因 gE/gI基因缺失毒株D2对上述5种细胞均较敏感,其在细胞增殖并引起细胞病变之能力均不如PRV Fa株明显。对照组PRV Fa强毒攻毒可导致上述9个器官发生明显病变;D2组PRV Fa强毒攻毒可导致肝脏、淋巴结、扁桃体3个组织器官发生明显病变。PRV Fa对照组在10个组织中均检测出PRV;而D2免疫组强毒攻毒后,在大脑、小脑中未检测出PRV,其余组织均检测出PRV。结果表明:(1)gE和gI基因产物所形成的复合体对病毒在细胞上的增殖功能:促进病毒在细胞间扩散;影响病毒从细胞的释放:促进细胞间融合。(2)gE/gI基因也是重要的毒力基因,gE/gI基因与PRV在肺脏的定植和毒力相关。缺失gE/gI双基因后的毒株,引起PRV毒力丧失或极显著地降低;该复合体介导PRV在神经组织的扩散途径,其中gE基因是PRV经三叉神经节侵入中枢神经组织所必需的基因,起主要作用;其缺失后的PRV只能到达一、二级神经元,不能到达三级神经元,阻止强毒由外周神经向中枢神经系统传播。(3)gE/gI基因具有嗜神经性,缺失后有抗潜伏感染的特性。 3.gE/gI/TK基因缺失gE/gI/TK三基因后的D3对上述5种细胞均敏感,在细

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中文摘要

ABSTRACT

英文缩写

引言

第一章文献综述

1.流行现状与危害

2.病毒及基因组

3.主要毒力基因

3.1 TK(UL23)基因

3.2 gE(US8)基因

3.3 gI(US7)基因

3.4 11K(US9)基因

3.5 28K(US2)基因

4.PRV的嗜神经性与潜伏感染特性

4.1 嗜神经特性

4.2 潜伏感染特性

5.PRV与细胞凋亡

5.1 PRV的溶细胞性复制

5.2 PRV引起的细胞凋亡

6.伪狂犬病的病理学研究

7.PRV的基因缺失疫苗研究

8.猪伪狂犬病的根除的策略与措施

第二章 PRV主要毒力基因缺失后在细胞中增殖规律的观察

1.材料与方法

1.1 材料

1.2 方法

2.结果

2.1 不同毒力基因缺失对病毒细胞培养特性的影响

2.2 不同基因缺失后在培养细胞增殖的超微结构观察

3.讨论

3.1 不同基因缺失对病毒细胞培养特性的影响

3.2 不同基因缺失影响病毒在培养细胞增殖的超微结构

4 结论

第三章 PRV主要毒力基因缺失后的致病性研究

1.材料与方法

1.1 材料

1.2 方法

1.3 临床症状观察

1.4 光镜检查

1.5 电镜检查

2 试验结果

2.1 临床症状

2.2 病理组织学观察

2.3 电镜观察结果

3.讨论

3.1 包含不同毒力基因缺失的伪狂犬病毒仔猪病理模型的建立

3.2 不同毒力基因缺失影响病毒的致病特性

3.3 不同毒力基因影响潜伏感染特性

3.4 包含不同毒力基因缺失的伪狂犬病毒对PRV感染机理的探讨

4 结论

第四章 PRV主要毒力基因缺失后的免疫原性研究

1.材料与方法

1.1 材料

1.2 方法

2.结果

2.1 临床观察

2.2 试验仔猪体温变化

2.3 PRV缺失株在仔猪体内的器官组织定植

2.4 PRV缺失株免疫后Fa株攻毒后动物排毒

2.5 血清抗体检测

2.6 攻击保护试验结果

3.讨论

3.1 临床观察

3.2 不同毒力基因缺失后病毒对野毒在仔猪体内定植的影响

3.3 接种和攻毒后猪的散毒

3.4 不同毒力基因缺失对病毒刺激机体产生免疫抗体水平的影响

4.结论

总结

参考文献

致谢

在读期间论文发表情况

发布时间: 2005-10-27

参考文献

[1].Ⅰ.两种伪狂犬病病毒诊断检测方法的建立 Ⅱ.影响猪瘟病毒复制的lncRNAs的筛选[D]. 孟星宇.中国农业科学院2018
[2].伪狂犬病病毒遗传变异及UL41和UL24基因功能分析[D]. 叶超.中国农业科学院2018
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[4].表达狂犬病病毒糖蛋白的重组伪狂犬病病毒的构建及免疫试验研究[D]. 袁子国.吉林大学2008
[5].伪狂犬病病毒细菌人工染色体的构建及应用[D]. 苏鑫铭.南京农业大学2006
[6].猪伪狂犬病鉴别诊断方法的研究及单克隆抗体的制备[D]. 覃雅丽.华中农业大学2002
[7].伪狂犬病病毒DNA聚合酶入核转运的分子机制[D]. 王一平.中国农业科学院2016
[8].乙型脑炎病毒—伪狂犬病病毒二联基因工程疫苗研究[D]. 徐静.四川农业大学2008
[9].细菌介导的重组伪狂犬病毒（PRV）载体的构建及转运哺乳动物细胞的方法研究[D]. 蒋思婧.华中农业大学2010

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