血红素加氧酶1（HO-1）对RAW264.7细胞TNF-α表达的影响

论文摘要

目的研究血红素加氧酶1（HO-1）对巨噬细胞肿瘤坏死因子α（TNF-α）的表达和分泌的影响,探讨HO-1抗动脉粥样硬化（AS）的分子机制。材料和方法采用RAW264.7细胞（小鼠的单核巨噬细胞株）,建立氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）诱导的巨噬细胞损伤模型,通过HO-1激动剂Hemin和抑制剂ZnPPⅨ作用于泡沫细胞,应用免疫细胞化学的方法测定泡沫细胞中HO-1和TNF-α的表达,观察HO-1对泡沫细胞中TNF-α表达的调控作用规律。结果（1）HO-1检测:正常对照组可见HO-1染色较浅的弱阳性细胞,泡沫细胞模型组HO-1表达显著增加。给予不同浓度HO-1诱导剂Hemin（5,10,50uM）的各实验组HO-1表达明显增加,并呈现一定的剂量依赖性。HO-1抑制剂ZnPPⅨ（10uM）组泡沫细胞的HO-1表达明显降低。各实验组与对照组比较差别有显著统计学意义（P＜0.05）。（2）TNF-α检测:正常对照组可见TNF-α染色较浅的弱阳性细胞,泡沫细胞模型组TNF-α表达显著增加。给予不同浓度的HO-1诱导剂Hemin（5,10,50uM）的各实验组TNF-α表达明显低于对照组水平,并呈现一定的剂量依赖性。HO-1抑制剂ZnPPⅨ（10uM）组的TNF-α表达明显升高。各实验组与对照组比较差别有显著统计学意义（P＜0.05）。结论Hemin诱导的HO-1可降低RAW 264.7细胞TNF-α的表达,并呈剂量时间依赖性:受ZnPPⅨ抑制的HO-1可使TNF-α的表达升高。证明HO-1具有降低TNF-α的作用,这可能是HO-1抗动脉粥样硬化的机制之一。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 引言
• 第一章 材料和方法
• 1.1 材料
• 1.1.1 主要实验仪器
• 1.1.2 主要实验试剂
• 1.1.3 主要试剂配制
• 1.1.4 实验细胞
• 1.2 主要实验方法
• 1.2.1 氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）的制备
• 1.2.2 RAW264.7细胞的培养
• 1.2.3 RAW264.7细胞的泡沫化处理
• 1.2.4 油红染色
• 1.2.5 药物处理和实验分组
• 1.2.6 HO-1免疫组化染色
• 1.2.7 免疫TNF-α组化染色
• 1.2.8 免疫组化阳性细胞的观察
• 1.2.9 统计学处理
• 第二章 结果
• 2.1 细胞形态观察
• 2.2 泡沫细胞鉴定
• 2.3 HO-1免疫组织化学染色结果
• 2.4 TNF-α免疫组织化学染色结果
• 第三章 讨论
• 3.1 动脉硬化的机制
• 3.2 血红素加氧酶与血红素加氧酶1
• 3.3 HO-1的抗动脉粥样硬化的特性与肿瘤坏死因子（TNF-α）
• 3.4 研究展望
• 结论
• 附图
• 参考文献
• 致谢
• 综述