论文摘要
目的:研究清热化痰法、益气活血法、两法联合运用及两法分阶段运用对博莱霉素诱发肺纤维化大鼠模型的影响,探讨其防治血管新生的理论依据和作用机制。 方法:(1) 理论探讨:在总结络病与肺纤维化血管新生相关性的基础上,探讨“肺虚络痹”的病机及从抗血管新生角度寻求中医药防治肺纤维化的理论依据。(2) 总体实验:①建立大鼠肺纤维化模型;②以呼吸频率、力竭性游泳时间观测大鼠行为学变化;③HE光镜及病理形态学定量分析观察大鼠病理学改变:④天狼星红染色偏光镜下观察肺纤维化大鼠Ⅰ、Ⅲ型胶原的动态变化;⑤链霉亲和素—生物素酶复合物法检测VEGF、ET-1及Ang-2,进行半定量分级分析,并用积分光密度法计算其阳性面积的IOD值;⑥观察肺组织微血管密度改变。(3) 细胞培养:①建立AM、IM细胞模型;②用原位杂交的方法检测TGF-β1mRNA表达水平;③积分光密度法计算巨噬细胞TGF-β1mRNA阳性面积的IOD值。 结果:①行为学:两法联合运用治疗28天后,呼吸频率、力竭性游泳时间有明显改善,与模型组比较有显著性差异(P<0.05)。②病理形态学:模型组7天时病理特点以大量炎性细胞浸润为主,至第28天可见较明显的纤维结缔组织增生,肺组织以胶原沉积、肺纤维化改变为主,肺泡结构破坏或消失,病损范围广泛;两法联合运用治疗28天后,与模型组之间有显著性差异(P<0.01)。③对Ⅰ、Ⅲ型胶原的影响:模型组早期病变以Ⅲ型胶原为主,Ⅲ/Ⅰ型胶原比例增高,后期病变则以Ⅰ型胶原为主,Ⅲ/Ⅰ型胶原比例下降;两法联合运用组治疗28天后能明显改善在肺间质周围的胶原分型比例,抑制Ⅰ型胶原,保持Ⅲ/Ⅰ型胶原比率。④对相关细胞因子的影响:模型组肺组织中促血管新生因子VEGF、ET-1及Ang-2含量升高,两法联合运用治疗28天后,能降低其高表达水平,VEGF、ET-1及Ang-2分级结果与积分光密
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