导读:本文包含了复制复合体论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:PRRSV,跨膜蛋白,非结构蛋白,相互作用
复制复合体论文文献综述
兰继勋[1]（2018）在《PRRSV具有跨膜特性的非结构蛋白参与病毒复制转录复合体形成机理的研究》一文中研究指出猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是严重危胁到全球养猪业的传染性疾病,其病原体是猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)。PRRSV编码的非结构蛋白nsp2、nsp3和nsp5是跨膜蛋白。为了探究这几个跨膜蛋白在病毒复制转录复合体(RTC)形成中的作用,本研究筛选并鉴定了与这叁个跨膜蛋白存在相互作用的非结构蛋白。首先采用酵母双杂交技术(Y2H),筛选出与nsp2、nsp3和nsp5有相互作用的蛋白,然后用双分子荧光互补(BiFC)技术验证了这些存在相互作用的蛋白,以去除假阳性结果。通过Y2H和BiFC,检测到nsp9、nsp12和跨膜蛋白nsp3、nsp5与多个非结构蛋白有相互作用,表明这些非结构蛋白可能充当RTC形成的核心组分。最后使用Pull-down技术进一步验证其中的部分蛋白间的相互作用。包含预测的跨膜结构域的疏水性非结构蛋白nsp2、nsp3和nsp5被认为涉及膜修饰和双层膜囊泡(DMV)的形成,这是由动脉炎病毒感染诱导的典型结构。在PRRSV的3种跨膜的非结构蛋白之间,我们发现nsp2与nsp3、nsp5与nsp3存在相互作用,并且nsp3自身也可以相互作用,因此推测这叁种PRRSV跨膜蛋白可能在病毒复制过程中形成膜结合的nsp2-nsp3(×n)-nsp5复合体,即以nsp3为中心,nsp2和nsp5为侧翼形成一个锚定在DMV膜上的一个支架,为复制转录复合体的形成起到招募非结构蛋白,并给以nsp9和nsp12为中心的RTC结构提供支撑,从而参与病毒的复制转录过程。(本文来源于《西北农林科技大学》期刊2018-05-01）
罗娟,郑素梅,高玉人[2]（2018）在《登革病毒复制复合体的研究进展》一文中研究指出登革病毒的复制与宿主细胞膜的重建紧密相关。病毒和细胞因子产生独特的类似细胞器的结构,被称为病毒复制复合体(viral replication complex),这些病毒诱导的隔间促进了高效基因组复制,在病毒复制周期中得以使不同步骤受到精确的时空调控,并且保护病毒RNA不受宿主细胞质环境影响。综合运用超微结构解析和功能研究大大增加了我们对病毒复制复合体构建和生物起源的理解。本文将介绍登革热病毒复制复合体的形态和形成,阐述其在生物发生中所取得的进展。(本文来源于《农村经济与科技》期刊2018年02期）
范许许[3]（2016）在《自噬复合体ATG5-ATG12促进Ⅰ型干扰素信号转导对口蹄疫病毒复制的影响》一文中研究指出口蹄疫(Foot-and-Mouth Disease,FMD)是由口蹄疫病毒(Foot-and-Mouth Disease Virus,FMDV)感染偶蹄类动物所引发的一种急性烈性传染病。天然免疫作为机体抗病毒感染的第一道防线,细胞内的模式识别受体通过识别病毒核酸或病毒产物,激活一系列级联反应、诱导I型干扰素和抗病毒因子的产生,最终实现抗病感染效果。细胞自噬是真核细胞维持稳态的一种重要的生命活动,是细胞内主要依赖于溶酶体的一种降解途径,通过将机体不需要的生物大分子包裹形成自噬体,并与溶酶体融合从而将内容物降解,自噬与许多疾病的发生密切相关,自噬也具有清除病原体的功能,这一功能通常与天然免疫密切相关,最终抵御病原微生物的感染。ATG5-ATG12复合物是自噬过程中的重要复合体,在自噬体膜的延伸过程中发挥着重要作用,自噬的许多功能与ATG5有关,下调ATG5-ATG12能有效阻断自噬,而且发现ATG5参与调控I型干扰素的表达。因此,研究自噬蛋白复合物ATG5-ATG12抗病毒的作用机制,将为抗病毒药物的研制和疫苗的开发提供理论基础。先前有研究表明FMDV可激活细胞自噬,本研究将根据这一现象进一步追踪口蹄疫病毒诱导自噬的分子机制以及自噬复合体ATG5-ATG12与天然免疫的调控关系。首先为了确定口蹄疫病毒是否能诱导宿主细胞系猪肾传代细胞(PK-15)细胞的自噬以及自噬复合体ATG5-ATG12的诱导表达情况,选择PK-15为研究对象,通过共聚焦激光显微镜技术和蛋白免疫印迹(Western blot)方法确定了自噬标志蛋白LC3-II/LC3-I的变化并检测了ATG5-ATG12蛋白的表达水平随FMDV感染的的规律;为了进一步确定自噬复合体ATG5-ATG12是否促进细胞抗病毒天然免疫,通过过表达ATG5-ATG12,分别利用Western blot、荧光定量PCR和TCID50试验,从蛋白、基因及病毒滴度等不同水平确定FMDV复制与ATG5-ATG12的关系,随后进一步利用Western blot和荧光定量PCR分析细胞因子及炎症因子IFN-β、IL-6、CXCL10、PKR和MX1的表达情况;为了证实ATG5-ATG12是否通过调控NF-κB信号进一步调节I型干扰素的转录,通过过表达ATG5-ATG12或抑制ATG5-ATG12表达的方法,以Western blot检测I型干扰素通路的关键分子NF-κB/p65的表达水平,IκBα的磷酸化水平以及降解水平等,并进一步通过共聚焦激光显微镜追踪p65在细胞中的定位。结果显示,口蹄疫病毒能够诱导PK-15细胞的自噬以及自噬复合体ATG5-ATG12的表达,ATG5-ATG12的过表达能抑制FMDV的复制,这一抑制现象是通过ATG5-ATG12促进NF-κB信号通路并进一步促进IFN-β的表达得以实现的。以上结果在猪肾细胞(IBRS-2)中有相似结果,但在I型干扰素缺陷的幼仓鼠肾细胞(BHK-21)中,ATG5-ATG12并不能抑制FMDV的复制,这从另一角度证实,ATG5-ATG12通过促进I型干扰素的表达达到抑制FMDV复制的效果。本研究从不同水平探究了ATG5-ATG12复合物对FMDV的抗病毒作用,并且揭示了ATG5-ATG12通过正向调控I型干扰素通路发挥抗病毒作用的机制,为深入研究FMDV的感染机制提供了新思路。(本文来源于《中国农业科学院》期刊2016-05-01）
薛慧君,许鑫,付钰[4]（2015）在《单分子水平观察前复制复合体动态形成过程的新发现（英文）》一文中研究指出Precise genomic DNA replication is critical for faithful transferring of genetic information to the next generation.Genomic DNA replication consists of three different stages:initiation,elongation and termination.In eukaryotic cells,DNA replication initiates from multiple specific(本文来源于《Science Bulletin》期刊2015年12期）
李保宾[5]（2014）在《布尼亚病毒转录复制复合体结构生物学研究》一文中研究指出布尼亚病毒（Bunyavirus）是一类传染性强，分布广，致死率高，能够引起人类及动物传染性疾病的RNA病毒。其中很多成员都是人类健康的致命杀手，例如在我国引起“新疆出血热”和“蜱虫病”的克里米亚-刚果出血热病毒（Crimean-Congohemorrhagic fever virus，CCHFV）和发热伴血小板减少综合症病毒（Severe feverwith thrombocytopenia syndrome virus，SFTSV）均属于布尼亚病毒。布尼亚病毒基因组由叁条负链RNA组成，分别为L、M和S。其中L编码RNA依赖的RNA聚合酶（RNA-dependent RNApolymerase，RdRp），M编码病毒表面糖蛋白（glycoproteins，Gn和Gc），S主要编码核蛋白（nucleocapsid protein，NP）。在病毒生命活动中，NP蛋白会结合和保护病毒基因组长度的RNA，并且与RdRp相互作用形成病毒转录复制的核心单位-核蛋白复合体（ribonucleoproteincomplex，RNP），负责病毒的转录和复制功能。布尼亚病毒不同种属之间，其NP蛋白存在着巨大的差异，内罗病毒属克里米亚-刚果出血热病毒NP分子量最大，为52kDa；汉塔病毒属汉塔病毒NP分子量为42kDa；正布尼亚病毒属布尼韦尔病毒NP分子量最小，为25kDa，这种显着性的差异也必将会引起其结构和生物学功能的不同。我们利用蛋白质晶体学和电子显微学等生物物理手段，对布尼亚病毒中分子量最小的布尼韦尔病毒核蛋白和分子量最大的克里米亚-刚果出血热病毒核蛋白展开了研究，探讨其结构和功能的差异。我们首先解析了布尼韦尔病毒（Bunyamwera virus，BUNV）NP-RNA复合物4聚体的晶体结构。从结构中可以发现，RNA结合于NP N端和C端结构域之间形成的一个富有正电荷的沟槽中；NP蛋白的N末端和C末端伸出两个柔性“手臂”，与邻近核蛋白相互作用，实现NP蛋白之间的寡聚。我们还结合了电镜等手段，共同阐释了BUNV NP蛋白结合和保护RNA以及RNP形成的机制。随后，我们在之前研究的基础上，分离出CCHFV NP寡聚体，并利用电子显微学方法重构了CCHFV NP5聚体的电镜结构。从结构中可以发现，NP蛋白通过“head-stalk”方式顺时针方向相互作用，实现NP-NP的寡聚作用；同时表明NP蛋白head和stalk结构域可能共同参与了RNA的结合。本研究从电镜角度揭示了CCHFV NP-NP相互作用方式，为RNP形成机制的研究提供了重要结构基础。(本文来源于《清华大学》期刊2014-04-01）
罗震,董星晨,李有杏,张琦,Cholho,Kim[6]（2013）在《多聚C结合蛋白-1与EV-71的5′非翻译区RNA相互作用在细胞内膜相关的复制复合体上促进病毒翻译与复制》一文中研究指出肠道病毒71型(EV71)是引起儿童手足口病的主要病原体,它被认为是导致严重的神经紊乱甚至死亡的传染源。EV71基因组是负链单链的RNA,由5′端非翻译区(5′UTR),编码区和3′端非翻译区组成。其中,EV71的5′UTR通过结合宿主细胞的蛋白,是病毒复制的一个重要元件。在本研究中,我们确认了多聚C(本文来源于《2013年湖北省暨武汉微生物学会会员代表大会暨学术年会论文摘要集》期刊2013-11-21）
卢菲,张慧[7]（2013）在《MLL-WDR5-RBP5甲基转移酶复合体调控DNA过度复制和染色体多倍性》一文中研究指出DNA过度复制是发生在染色体上的常见细胞行为,但是其分子机制并不完全明了。我们新近研究表明MLL-WDR5-RBBP5甲基转移酶复合体的主要成分RBBP5能定位到DNA复制起始点。而MLL-WDR5-RBBP5甲基转移酶复合体是负责组蛋白H3第4位赖氨酸(H3K4)甲基化的蛋白复合体。RNA干扰去除细胞内的RBBP5或者WDR5都能抑制由Geminin或CDT2缺失(本文来源于《细胞—生命的基础——中国细胞生物学学会2013年全国学术大会·武汉论文摘要集》期刊2013-04-19）
董阳超,雷迎峰,丁天兵,时莹,潘鹭翔[8]（2013）在《宿主蛋白LSm1-7复合体在登革病毒RNA复制中的作用研究》一文中研究指出目的探讨LSm1-7复合体在登革病毒(DENV)RNA复制中的作用。方法 DENV感染HepG2细胞后,在不同时间点(2、24、36、48h)收集细胞和提取总mRNA,实时定量PCR(RT-qPCR)分析LSm1表达水平;将LSm1的siRNA和非特异对照siRNA两次转染HepG2细胞后感染DENV-2,24h后收集细胞,提取总mRNA,RT-qPCR分析LSm1表达水平与病毒RNA表达水平;利用LSm1抗体与dsRNA抗体对DENV感染细胞进行免疫荧光染色,激光共聚焦分析LSm1与dsRNA共定位情况。结果与2h比较,随着时间的推移,DENV-2 RNA和LSm1 RNA水平逐渐升高;与对照组siNC比较,siLSm1组LSm1 RNA水平明显降低,沉默效率达78.2%;与对照组siNC比较,siLSm1组DENV RNA含量降低35.6%;LSm1-7复合体在DENV感染HepG2细胞后募集到核周围,与DENV dsRNA共定位。结论 LSm1-7复合体可能作为DENV复制复合物的组成部分,正调控DENV RNA的复制。(本文来源于《热带医学杂志》期刊2013年01期）
董阳超,雷迎峰,徐志凯[9]（2013）在《LSm1-7复合体在病毒复制中作用的研究进展》一文中研究指出LSm蛋白家族属于一类RNA结合蛋白,广泛存在于真核细胞生物、细菌、古菌和植物中。LSm是Sm样蛋白的缩写。1966年Sm抗原首先在系统性红斑狼疮患者中被发现,并因患者StephanieSmith而得名[1]。随后Sm蛋白复合体被发现,由SmB′/B(B和B′是异构体)、SmD1、SmD2、SmD3、SmE、SmF、SmG 7个蛋白组成,与4个snRNAs(U1、U2、U4和U5)结合形成snRNPs,参与细胞核内pre-mRNA的剪切加(本文来源于《中国病毒病杂志》期刊2013年01期）
董阳超,雷迎峰,潘鹭翔,时莹,丁天兵[10]（2012）在《宿主蛋白LSm1-7复合体在登革病毒RNA复制中作用的初步研究》一文中研究指出目的探讨LSm1-7复合体在登革病毒(DENV)RNA复制中的作用。方法 DENV感染HepG2细胞后,在不同时间点(2、24、36、48 h)收集细胞和提取总mRNA,实时定量PCR(RT-qPCR)分析LSm-1表达水平;将LSm-1的siRNA和非特异对照siRNA 2次转染HepG2细胞后感染DENV-2,24 h后收集细胞,提取总mRNA,RT-qPCR分析LSm-1表达水平与病毒RNA表达水平;利用LSm-1抗体与dsRNA抗体对DENV感染细胞进行免疫荧光染色,激光共聚焦分析LSm-1与dsRNA共定位情况。结果与2 h时相比,随着时间的推移,DENV-2 RNA和LSm1 RNA水平逐渐升高;与对照组siNC相比,siLSm1组LSm1 RNA水平明显降低,沉默效率达78.2%;与对照组siNC相比,siLSm1组DENV RNA含量降低35.6%;LSm1-7复合体在DENV感染HepG2细胞后募集到核周围,与DENV dsRNA共定位。结论 LSm1-7复合体可能作为DENV复制复合物的组成部分,正调控DENV RNA的复制。(本文来源于《2012全国临床微生物与感染免疫学术研讨会论文集》期刊2012-10-13）
复制复合体论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
登革病毒的复制与宿主细胞膜的重建紧密相关。病毒和细胞因子产生独特的类似细胞器的结构,被称为病毒复制复合体(viral replication complex),这些病毒诱导的隔间促进了高效基因组复制,在病毒复制周期中得以使不同步骤受到精确的时空调控,并且保护病毒RNA不受宿主细胞质环境影响。综合运用超微结构解析和功能研究大大增加了我们对病毒复制复合体构建和生物起源的理解。本文将介绍登革热病毒复制复合体的形态和形成,阐述其在生物发生中所取得的进展。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
复制复合体论文参考文献
[1].兰继勋.PRRSV具有跨膜特性的非结构蛋白参与病毒复制转录复合体形成机理的研究[D].西北农林科技大学.2018
[2].罗娟,郑素梅,高玉人.登革病毒复制复合体的研究进展[J].农村经济与科技.2018
[3].范许许.自噬复合体ATG5-ATG12促进Ⅰ型干扰素信号转导对口蹄疫病毒复制的影响[D].中国农业科学院.2016
[4].薛慧君,许鑫,付钰.单分子水平观察前复制复合体动态形成过程的新发现（英文）[J].ScienceBulletin.2015
[5].李保宾.布尼亚病毒转录复制复合体结构生物学研究[D].清华大学.2014
[6].罗震,董星晨,李有杏,张琦,Cholho,Kim.多聚C结合蛋白-1与EV-71的5′非翻译区RNA相互作用在细胞内膜相关的复制复合体上促进病毒翻译与复制[C].2013年湖北省暨武汉微生物学会会员代表大会暨学术年会论文摘要集.2013
[7].卢菲,张慧.MLL-WDR5-RBP5甲基转移酶复合体调控DNA过度复制和染色体多倍性[C].细胞—生命的基础——中国细胞生物学学会2013年全国学术大会·武汉论文摘要集.2013
[8].董阳超,雷迎峰,丁天兵,时莹,潘鹭翔.宿主蛋白LSm1-7复合体在登革病毒RNA复制中的作用研究[J].热带医学杂志.2013
[9].董阳超,雷迎峰,徐志凯.LSm1-7复合体在病毒复制中作用的研究进展[J].中国病毒病杂志.2013
[10].董阳超,雷迎峰,潘鹭翔,时莹,丁天兵.宿主蛋白LSm1-7复合体在登革病毒RNA复制中作用的初步研究[C].2012全国临床微生物与感染免疫学术研讨会论文集.2012