论文摘要
目的:研究家兔发生视网膜缺血再灌注损伤后不同时间点细胞间粘附分子-1(ICAM-1)的表达及视网膜结构、功能损伤情况。方法:选取正常无眼疾家兔50 只,随机分为10 组,即正常对照组(A)、单纯灌注组(B)、再灌注后0 小时组、3 小时组、6 小时组、12 小时组、24小时组、48 小时组、4 天组、7 天组,每组N=5 只家兔(眼只数n=10 只)。采用前房灌注至高眼压的方法制作视网膜缺血再灌注损伤模型;造模完成后在预定时间点给各组实验动物作F-ERG 检查,观察网膜功能状态;在预定时间点处死动物,摘取眼球标本,进行HE 染色及免疫组化SABC 染色,光镜下观察网膜结构损伤及ICAM-1 表达情况,并应用图像分析对后者进行量化;选取正常组、再灌注3 小时组和再灌注24 小时组作电镜,观察网膜超微结构的改变;应用SPSS 软件对数据进行统计学分析。结果:1. F-ERG 检查:A、B 两组b 波振幅差别无统计学意义(P>0.05),再灌注0 小时组b 波振幅降至8.71±2.09μv,至再灌注后3 小时,b 波振幅部分恢复,其后b 波振幅呈持续性、进行性下降;2.光镜观察:神经纤维层及内丛状层水肿逐渐加重,神经节细胞数量递减,内核层排列疏松;再灌注6 小时视网膜中开始出现浸润的白细胞,再灌注24 小时达高峰,48小时后逐渐减少,但网膜结构损伤日趋严重;3.电镜观察:再灌注3 小时后家兔视网膜视细胞外节盘膜形态变化尚不明显,仅见内节线粒体轻度肿胀,再灌注7 天后视网膜外节盘膜疏松变形,内节结构紊乱,内外核层明显水肿,可见核固缩、核溶解,神经节细胞严重变性;4. 视网膜ICAM-1的表达:ICAM-1 免疫反应产物定位于血管内皮细胞膜。A 组及B 组视网膜血管仅有少量淡黄色着染,经60 分钟的缺血后,随再灌注时间的延长,阳性反应的血管数增多,且着色加深,至再灌注后24 小时反应达高峰。结论:本实验通过对缺血再灌注后视网膜的结构、功能和ICAM-1 表达的动态研究,说明在视网膜缺血再灌注早期损伤过程中,ICAM-1 对白细胞从血流中浸润到网膜,发挥其损伤作用有关键性促进作用。
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