外周血微小残留白血病细胞的定量检测及临床应用

外周血微小残留白血病细胞的定量检测及临床应用

论文摘要

急性白血病患者经化疗或造血干细胞移植后,多数可以获得完全缓解,但是仍有许多患者在完全缓解后复发,导致白血病复发的根源是微小残留白血病(MRL)的存在,此时体内残留的白血病细胞称为微小残留白血病细胞(MRLC)。MRLC 是提示缓解、预后和复发的主要指标。发现白血病细胞的共同基因标志、建立有效可行的检测MRLC 的实验室诊断方法,对于白血病的治疗、疗效评价、预后判断和复发监测都具有十分重要的临床意义。本研究以FLT3 基因作为检测白血病细胞的标志,建立了极限稀释定量PCR 技术检测外周血中MRLC 的方法学,对25 例初诊急性白血病患者外周血进行了FLT3 基因检测,极限稀释定量PCR方法敏感度为10 个拷贝,证明该方法具有操作简单、敏感度高、能够定量的优点。研究表明:①FLT3 基因检测阳性率为80%(20/25),其中AML88.2%(15/17),ALL62.5%(5/8)。②应用极限稀释定量法对20 例FLT3 基因检测阳性的急性白血病患者体内存在的白血病细胞数进行了定量检测,结果显示初诊组外周血DNA 含量平均为(2.36±1.25)×10~8pg/μl,相当于平均每μl 外周血含有(18.66±8.79)×10~6个白血病细胞。经过一个疗程化疗后,未缓解组1 例,外周血DNA 含量为1.69×10~7pg/μl,相当于每μl外周血含有1.01×10~6 个白血病细胞。部分缓解组3 例,外周血DNA 含量平均为(0.57±0.24)×10~6pg/μl,相当于平均每μl 外周血含有(1.82±0.19)×10~3个白血病细胞。完全缓解FLT3 检测阳性组7 例,外周血DNA 含量平均为(0.16±0.06)×10~6pg/μl,相

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