论文摘要
β-catenin与MMP-7在残胃癌组织中的表达及其临床意义前言残胃癌是一种比较常见的恶性肿瘤,近年来发生率有逐渐升高的趋势,其发生机制颇为复杂。研究表明,残胃癌的发生、发展与许多基因的异常表达有关。β-catenin与MMP-7在恶性肿瘤的发生发展过程中的作用日益受到关注,本实验采用免疫组化S-P法来检测32例残胃癌及癌旁组织的β-catenin与MMP-7的表达况,皆在探讨残胃癌发生发展的分子机制,对残胃癌的早期发现,预后判定和治疗进一步奠定基础。方法一、实验材料(一)病例标本32例残胃癌标本均取自1998年10月—2006年6月中国医科大学附属第一医院肿瘤外科手术病人,首次手术原因均为胃良性病变。患者年龄40—80岁(平均60.25岁),其中男性26例,女性6例。所有标本经4%甲醛固定,石蜡包埋。5μm厚连续切片,分别行苏木素—伊红及免疫组化染色。全部病例按UICC新TNM分期、日本胃癌处理规约及中国医科大学肿瘤研究所胃癌外科分型进行分期分型,以上病例均经病理证实。(二)实验用品1、主要试剂β-catenin即用型单克隆抗体、MMP-7浓缩型单克隆抗体、S-P试剂盒、DAB显色剂、0.01mmolPBS溶液、3%双氧水、柠檬酸缓冲液。2、主要仪器切片机,显微镜,保湿盒,冰箱,高压锅,PH试纸。二、实验方法(一)组织切片染色采用免疫组化S-P法对切片分别进行β-catenin即用型单克隆抗体、MMP-7浓缩型单克隆抗体染色,其中MMP-7浓缩型单克隆抗体稀释倍数为1∶300,具体步骤按试剂盒说明书逐步操作。(二)结果判定β-catenin按照Jawhari等的方法,染色分级标准为:0分,细胞膜表达减少或基本消失;1分,细胞质或细胞核表达;2分,异质性表达减弱;3分,保留细胞膜的表达。0~2分为异常表达,3分为正常表达。MMP-7根据阳性细胞染色程度及着色细胞百分率进行记分:0分,基本不着色;1分,着色淡;2分,着色深。着色细胞占全部记数细胞百分率<5%为0分;5%~25%为1分;26%~50%为2分;>50%为3分。两种分值相乘≤1分为阴性,2~4分为阳性。(三)统计学处理采用SPSS13.0统计分析软件进行统计学处理,应用Fisher精确概率法分析β-catenin与MMP-7的表达与临床病理的关系。应用speraman相关分析β-caten-in与MMP-7的相互关系,P<0.05为有显著差异。结果一、β-catenin、MMP-7与残胃癌组织中的表达情况在32例癌旁组织中4例(12.5%)细胞膜B-catenin异常表达,而残胃癌组织中则19例细胞膜(59.4%)异常表达,残胃癌组织β-catenin表达的阳性率高于癌旁组织(P<0.01);在32例癌旁组织中无MMP-7阳性表达,而残胃癌组织中则18例(56.3%)阳性表达,残胃癌组织MMP-7表达的阳性率高于癌旁组织(P<0.01)。二、β-catenin和MMP-7与残胃癌临床病理之间的关系β-catenin的异常表达与肿瘤大小、大体分型、浸润深度和生长方式均显著相关(P<0.05),而与年龄、性别、分化程度和淋巴结转移无关。MMP-7异常表达与浸润深度、生长方式和淋巴结转移均显著相关(P<0.05),与年龄、性别、肿瘤大小、大体分型、分化程度因素无关。三、β-catenin和MMP-7在残胃癌中表达的相互关系经speraman相关分析表明残胃癌组织中β-catenin和MMP-2表达具有显著相关性(rs=0.55,P<0.05)。结论1、残胃癌组织中β-catenin的异常表达与MMP-7异常表达均显著高于癌旁组织,表明与残胃癌的恶性转化和浸润转移有密切关系。2、β-catenin的异常表达和MMP-7异常表达二者在癌组织呈现一致性增高,提示β-catenin与MMP-7的协同表达可能在残胃癌浸润转移中发挥着重要的作用。
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