胆固醇代谢与阿尔茨海默病、帕金森痴呆的关系研究

论文摘要

第一部分AD的血脂水平研究AD是一种多因素疾病，近年来，越来越多的研究提示血管因素在AD的发病机制中起着重要作用。流行病学研究显示，高胆固醇血症病人发生AD的危险性增加，遗传学和细胞生物学研究显示，胆固醇在淀粉样前体蛋白（amyloidprecursor protein，APP）代谢中起着一定作用。临床研究中，多数认为AD患者血浆总胆固醇的含量下降，但少数结果相反。国外对AD患者血脂研究较多，国内的资料较少。目的：我们收集了中国天津地区汉族人群散发性AD患者的血脂指标，以期发现中国北方人群中AD患者血脂水平的特点。方法：选取AD患者69例，健康对照55例，于清晨对AD患者及对照采集空腹静脉血，分离血清，采用HITACHI7170型全自动生化分析仪直接法测定。用SPSS软件11.5对数据进行统计分析。结果：①AD组血浆胆固醇水平高于对照组，差异有统计学意义，t=5.423，P=0.000。②女性AD组血浆胆固醇水平高于对照组，差异有统计学意义，t=6.314，P=0.000。③女性AD组血浆高密度脂蛋白水平低于对照组，差异有统计学意义，t=2.598，P=0.012。结论：中国北方人群女性AD病人血浆胆固醇水平增高，同时血浆高密度脂蛋白水平降低。第二部分ApoE和CYP46基因多态性与AD、PDD、PD发病关系研究目的：存在于载脂蛋白E（ApoE）的ε4等位基因已被确定为晚发性AD的易患基因。PD合并痴呆（PDD）的发病机制至今未明。ApoE基因多态性与PDD关系的研究结果有很大分歧。对我国汉族人群PDD与ApoE的关系研究鲜有报道。为了明确它们二者的关系，我们进行了本组实验。CYP46基因是除ApoE外的另一个与脂代谢关系密切的基因。有研究发现，在该基因第二位内含子的1个T／C单核苷酸多态性与AD有关。我们分析了该基因多态性在本组人群中的分布，并探讨其与AD、PDD、PD的关系。方法：病例组为2004年-2006年经天津医科大学总医院神经内科锥体外系门诊诊断的患者，其中AD60例，PD68例，PDD53例。从同期在总医院查体中心查体人员中选出56例作为健康对照组（包括脑、心、肝、肾功能及血脂代谢正常）。每名研究对象采静脉血2ml，提出全血基因组DNA后，采用基因芯片对所有研究对象进行ApoE和CYP46基因的检测。用SPSS软件11.5对数据进行统计分析。结果：①本文所选研究对象ApoE和CYP46基因分型符合Hardy-Weinberg平衡。②本文所选研究对象ApoE基因分型ε3／3型都是最多的。③AD和PDD组携带ε4等位基因的基因型（ε2／4、ε3／4、ε4／4）分布频率高于PD和对照组，而ε2／2基因型分布频率低于PD和对照组。对照组ε2／3基因型分布频率高于病例组（AD、PDD和PD）。各组携带ApoEε3等位基因频率都是最高的。AD组和PDD组携带ApoEε4等位基因的频率明显高于PD和对照组。对照组携带ApoEε2等位基因的频率高于病例组。④带有ApoEε4等位基因患AD的风险是不带有ε4等位基因的4.909倍，带有ApoEε4等位基因患PDD的风险是不带有ε4等位基因的3.086倍。携带2个ApoEε4等位基因患AD的风险是携带0个ApoEε4等位基因的731637832.436倍，患PDD的风险是携带0个ApoEε4等位基因的344914978.148倍，患PD的风险为201200403.920倍。携带1个ApoEε4等位基因患AD的风险是携带0个ApoEε4等位基因的4.182倍，患PDD的风险为2.743倍。⑤AD和PDD组C／C基因型分布频率明显高于对照组。⑥CYP46基因C或T等位基因与AD、PDD和PD的发病风险无明显关联。结论：1中国天津地区汉族人群ApoE基因型以ε3／3最多。2中国天津地区汉族人群AD、PDD患者ApoEε4等位基因频率增高。3携带ε4等位基因患AD、PDD的发病风险大于不携带ε4等位基因的患者。4 AD和PDD组CYP46的C／C基因型分布频率明显高于对照组。5本组研究未发现CYP46等位基因与AD和PDD的发病有明显关联。第三部分AD、高胆固醇血症患者血小板APPr的研究β样淀粉样蛋白（Aβ）无论在散发性还是家族性的AD中的发病机制中，都起着重要的作用。Aβ来源于淀粉样前体蛋白（APP）的分解。血小板包含了外周循环中95％以上的APP。在AD病人的血小板中，APP代谢的淀粉样途径被激活，与脑组织的变化相类似。单克隆抗体22C11可以封闭APP的氨基末端，所以用其做免疫印迹，可以把这些APP分成分子量为120-130kDa和110kDa的两个片段。许多研究发现AD病人这两种片段的比例（APPr）与对照组相比有明显下降。目的：我们率先测定我国AD患者外周血小板源性的APPr的变化，同时我们还测定了高胆固醇血症患者这个指标的变化，以期发现我国AD及高胆固醇血症患者APPr的特点。方法：用蛋白免疫的方法（Western Blotting），对16例男性AD患者及其健康对照和16例男性高胆固醇血症患者及其健康对照的血小板APPr进行测定，用SPSS软件11.5对数据进行统计分析。结果：①AD组血小板的APPr小于对照组，差异有统计学意义，t=19.448，P=0.000。②高胆固醇血症血小板的APPr小于对照组，差异有统计学意义，t=-41.611，P=0.000。结论：1中国北方汉族人群AD病人血小板APPr与对照组相比明显下降。2高胆固醇血症病人血小板APPr与对照组相比也有明显下降。3血小板APPr有望成为诊断AD的外周生物学指标。

论文目录

• 中文摘要
• ABSTRACT
• 前言
• 第一部分 AD的血脂水平研究
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 第二部分 ApoE和 CYP46基因多态性与 AD、PDD、PD发病关系的研究
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 第三部分 AD、高胆固醇血症患者血小板 APPr的研究
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 附录一
• 附录二
• 附录三
• 在学期间发表论文
• 致谢