Ceramide和p53介导AngⅡ诱导细胞凋亡的研究

论文摘要

目的：血管内皮细胞作为整个心血管系统的内衬，对维持正常心血管系统功能有着重要的作用，其损伤及功能变化与心力衰竭、冠心病等心血管疾病的发生和发展密切相关。血管紧张素Ⅱ（AngiotensinⅡ，AngⅡ）作为肾素-血管紧张素系统（renin-angiotensin system，RAS）的主要活性肽，可引起体内一系列的病理反应，包括加重炎性反应、诱导细胞凋亡的发生等，并可以直接导致心肌重构而引起终末器官的直接损害，同时AngⅡ也被认为是多种炎性反应的介质，AngⅡ的作用主要通过其特异性受体血管紧张素Ⅱ一型受体（AT1）和血管紧张素Ⅱ二型受体（AT2）来实现。神经酰胺（ceramide）属于鞘脂类一族，其特征是有鞘氨基骨架和特异性的N端序列。近年来越来越多的研究表明ceramide作为细胞内脂质第二信使，它易被炎性因子激活，从而启动下游靶基因的表达引起多种生物学现象，在细胞增殖、分化、生长抑制和凋亡等多种细胞活动中发挥调节作用，特别是在诱导细胞凋亡的过程中起着重要的作用。p53是转录激活蛋白，作为“基因警卫”维持细胞基因的完整、DNA损伤的修复以及细胞周期的正常运转。野生型p53蛋白对细胞增殖、转化有抑制作用，能促进细胞凋亡的发生。Ceramide和p53都是促凋亡因子，都能引起内皮细胞的凋亡，它们介导的生物学效应对心血管系统有着重要的影响。因此，研究AngⅡ对血管内皮细胞凋亡的影响以及ceramide和p53在其中的作用及机理，对心血管疾病的防治具有重要的理论基础和实际意义。方法：（1）用AngⅡ干预血管内皮细胞，Tunel法检测血管内皮细胞的凋亡情况，用ceramide、p53、AT1和AT2抑制剂来预处理细胞，检测细胞的凋亡了解ceramide、p53、AT1和AT2在AngⅡ诱导血管内皮细胞凋亡中的作用。（2）采用RT-PCR、Western Blot方法检测AngⅡ和ceramide干预血管内皮细胞后p53 mRNA和蛋白表达的变化，并用ceramide和p53抑制剂来进行干预，探讨ceramide和p53在AngⅡ诱导血管内皮细胞凋亡中的作用及相互关系。结果：（1）AngⅡ呈时间和剂量依赖性引起血管内皮细胞凋亡的发生；AT2的拮抗剂能抑制AngⅡ引起的血管内皮细胞凋亡，而AT1的拮抗剂无此作用；ceramide拮抗剂可以抑制AngⅡ诱导的血管内皮细胞凋亡的发生。（2）Ceramide拮抗剂可以抑制AngⅡ诱导的p53 mRNA和蛋白表达的增加；p53mRNA和蛋白表达随着ceramide浓度的增加而降低。结论：在AngⅡ诱导血管内皮细胞凋亡的过程中，AngⅡ与AT2相结合后激活ceramide，通过ceramide来诱导血管内皮细胞凋亡，ceramide是其中的重要环节；p53可能处于ceramide的下游，ceramide可能不经过p53途径来诱导血管内皮细胞凋亡。

论文目录

• 一、英文缩写一览表
• 二、中文摘要
• 三、英文摘要
• 四、论文正文 Ceramide和p53介导AngⅡ诱导的细胞凋亡的研究
• 前言
• 第一部分 AngⅡ对内皮细胞的影响及ceramide和p53在其中的作用
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 小结
• 第二部分 ceramide对内皮细胞的影响及p53在其中的作用
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 小结
• 全文小结
• 参考文献
• 五、文献综述 神经酰胺在细胞凋亡中的作用
• 参考文献
• 六、硕士在读期间发表的论文
• 七、致谢