论文摘要
目的：胃癌是常见的恶性肿瘤之一,具有高发病率和高死亡率的特点,其5年生存率仅约30%-40%。目前胃癌发病的microRNA分子机制相关研究资料仍相当有限,本文研究miR-650的表达与胃癌细胞增殖及凋亡等活动之间的关系,探讨了miR-650在胃癌发病机制中的调控作用及临床意义。方法：采用RT-PCR检测miR-650在胃癌组织及胃癌细胞中的表达水平,分析患者术后生存期与miR-650的表达水平等临床因素间的内在联系,胃癌细胞转染成熟miR-650序列及其抑制剂-LNA寡核苷酸序列后,利用CCK-8试剂盒检测细胞增殖情况,利用流式细胞仪检测细胞凋亡情况,通过LC-MSMS系统定量分析筛选miR-650靶蛋白,采用Western Blot检测miR-650靶蛋白RGS7的表达水平,裸鼠体内研究评估miR-650对胃癌细胞的生物学影响及其抑制剂的生物疗效。结果：胃癌组织中miR-650表达水平存在明显差异,患者术后生存期与miR-650的表达水平密切相关,而与性别、肿瘤大小及肿瘤分期等临床因素无明显相关性。KATO Ⅲ、NUGC4及SGC-7901细胞高水平表达miR-650,而NCI-N87及MKN-45细胞仅微量表达miR-650,胃癌细胞转染miR-650抑制剂后其增殖能力明显下降,胃癌细胞凋亡水平明显上升,同时发现RGS7蛋白是miR-650下游靶蛋白之一,靶蛋白RGS7表达水平与miR-650表达水平呈负相关,动物体内研究证实miR-650抑制剂可显著抑制体内肿瘤生长。结论：胃癌细胞中miR-650的高水平表达可促进细胞增殖并抑制其凋亡,其机制可能是抑制靶蛋白RGS7的表达。MiR-650在胃癌形成过程中可调控胃癌细胞的增殖及凋亡等多个过程,并且其不同表达水平与患者术后生存期长短密切相关,因此miR-650有可能作为一种新型特异性肿瘤标志物,对我们全面理解胃癌发病机制、寻找诊断和治疗靶点及预后监测等将具有重要的潜在临床价值。
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