论文摘要
目的:研究维甲酸β受体(RAR β)在肺癌细胞的增殖、分化和诱导细胞凋亡中的作用以及探究其作用的机理。 方法:应用脂质体将RAR β的表达载体pcDNA3.0-RAR β瞬时转染到RAR β表达下降的肺腺癌细胞A549中,通过观察细胞形态学变化、应用流式细胞仪测细胞周期、提取试验组细胞总DNA、MTT检测细胞生长状况,检测细胞凋亡;RT-PCR检测细胞RAR β、p53、cdk4、cyclinD1的表达水平。固相pH梯度双向凝胶电泳分离A549、正常人胚肺(HELF)、转染RAR β表达载体的A549细胞(RAR β—A549)总蛋白,银染显色,应用软件对所得结果进行统计学分析。 结果:试验组细胞形态学观察:细胞皱缩、黏附性降低;染色体出现凝集和边集现象;流式细胞仪检测到细胞凋亡率为65.8%;细胞DNA断裂,弥散成片状。RT-PCR显示试验组细胞中RAR β表达明显升高、p53的表达无明显变化、cdk4和cyclinD1的表达明显降低。二维凝胶电泳结果显示A549的平均蛋白质点数为(1154±86)个,HELF的平均蛋白质点数为(1338±79)个,RARβ—A549的平均蛋白质点数为(987±64)个,不同胶间蛋白质点的位置偏差在IEF方向为(2.97±0.34)mm,在SDS-PAGE方向为(2.73±0.45)mm,差异表达分析发现,A549细胞和HELF细胞双向电泳分离图谱有893个蛋白质点匹配;A549中有329个点未被匹配,HELF细胞中有445个点未被匹配。A549和RAR β—A549进行匹配,有634个点相互匹配,A549有520个点未被匹配,RAR β—A549有205个点未被匹配。方差分析结果:F=15.488,P<0.05。A549组与HELF组比较差异具有统计学意义(P<0.05);A549组与RAR β—A549组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。 结论:9—顺—维甲酸通过RAR β受体诱导细胞凋亡并且显著降低cdk4、
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标签:维甲酸论文; 维甲酸受体论文; 肺肿瘤论文; 信号传导论文; 周期因子论文; 细胞凋亡论文; 二维凝胶电泳论文; 蛋白质组论文;