苦瓜对黄足黑守瓜的抗虫性及抗虫性物质的初步研究

论文摘要

苦瓜（Momordica charantia L.）整个生长过程中,只有瓜实蝇、瓜蚜、瓜绢螟等少数几种植食性昆虫可以取食为害,对大多数植食性昆虫表现出明显的抗虫性,根据昆虫与植物的关系和植物化学防御理论,这可能与苦瓜植株中含有某类抗虫性次生物质有关,本文就此对苦瓜叶中所含有的次生化合物运用生物活性追踪的方法,进行了系统的分离,初步测定了苦瓜叶中的次生物质对黄足黑守瓜（Aulacophora cattigarensis Weise）成虫取食影响,主要结果如下:（1）采用有机溶剂浸提法,从苦瓜叶中获得的各种粗提物对黄足黑守瓜成虫表现出的拒食活性各异,而以苦瓜叶氯仿粗提物对黄足黑守瓜成虫取食拒食活性最高,其拒食活性随着浓度的升高而增强,在浓度8mg/mL下拒食率达到100%,且在48h内随时间变化在非选择性和选择性条件下的拒食效果表现出增强的趋势。（2）采用硅胶柱色谱分离法,对苦瓜叶氯仿粗提物进一步分离,得到K1～K11等11个分离组分,在非选择条件下,以1mg/mL浓度处理后,11个组分对黄足黑守瓜成虫拒食活性各异,其中以K4和K9对黄足黑守瓜成虫取食拒食活性最高,其拒食活性在48h内随时间变化,其拒食效果表现出增强的趋势。（3）采用固相微萃取法,充分提取到了苦瓜挥发性次生物质,利用GC/MS联用仪,鉴定出苦瓜挥发性次生物质有69个组分,其中挥发成分鉴定结果的主要成分:（Z）-3-已烯-1-醇32.57%,正三十四烷16.34%,棕榈醛10.33%,6,6-二甲基-二环[3.1.1]庚-2-烯-2-甲醇5.28%,γ-生育酚3.86%。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1 前言
• 1.1 植物对昆虫的防御
• 1.1.1 植物对昆虫的物理防御
• 1.1.2 植物对昆虫的化学防御
• 1.2 植物挥发性次生物质的研究方法
• 1.2.1 挥发性次生物质的收集
• 1.2.2 植物挥发性次生物质的鉴定
• 1.3 苦瓜及苦瓜抗虫性
• 1.4 黄足黑守瓜的研究进展
• 1.5 选题意义和研究思路
• 1.6 本实验的技术路线
• 2 材料与方法
• 2.1 试验材料
• 2.1.1 供试昆虫
• 2.1.2 供试植物
• 2.2 仪器与试剂
• 2.2.1 主要仪器
• 2.2.2 供试药品
• 2.3 试验方法
• 2.3.1 黄足黑守瓜和斑潜蝇在田间葫芦科植物上的分布调查
• 2.3.2 苦瓜、丝瓜和黄瓜叶蛋白质含量的测定
• 2.3.3 苦瓜、丝瓜和黄瓜叶还原糖和总糖含量的测定
• 2.3.4 蛋白质含量测定标准曲线
• 2.3.5 还原糖和总糖含量测定标准曲线
• 2.3.6 苦瓜次生物质的提取与分离
• 2.3.7 苦瓜提取物硅胶柱色谱分离
• 2.3.8 苦瓜提取物室内生物活性测定
• 2.3.9 苦瓜挥发性化学成分的收集与鉴定
• 2.4 苦瓜提取物对黄足黑守瓜成虫取食影响的评价方法
• 3 结果与分析
• 3.1 黄足黑守瓜和斑潜蝇对田间不同葫芦科作物嗜食程度的调查结果
• 3.2 苦瓜、丝瓜和黄瓜叶中的营养成分与黄足黑守瓜取食为害的关系
• 3.3 苦瓜不同提取物对黄足黑守瓜成虫取食的影响
• 3.3.1 苦瓜叶石油醚提取物对黄足黑守瓜成虫取食的影响
• 3.3.2 苦瓜叶氯仿提取物对黄足黑守瓜成虫取食的影响
• 3.3.3 苦瓜叶乙醇提取物对黄足黑守瓜成虫取食的影响
• 3.3.4 苦瓜叶乙醇不同溶剂萃取物对黄足黑守瓜成虫取食的影响
• 3.3.5 苦瓜叶不同提取物对黄足黑守瓜成虫取食的影响对比
• 3.4 苦瓜挥发性物质的GC/MS成分分析结果
• 3.5 苦瓜氯仿提取物的硅胶柱色谱分离
• 3.5.1 苦瓜氯仿提取物的硅胶柱色谱分离
• 3.5.2 硅胶柱色谱分离各组分对黄足黑守瓜的取食影响
• 4 结论
• 4.1 确定了影响黄足黑守瓜取食苦瓜的原因是苦瓜的抗虫性次生物质
• 4.2 在苦瓜叶粗提物中,氯仿粗提取对黄足黑守瓜成虫的拒食作用最强
• 4.3 苦瓜叶氯仿粗提物硅胶柱色谱分离组分中具有最强生物活性的组分
• 4.4 苦瓜挥发性次生物质的成分分析
• 5 讨论
• 5.1 苦瓜次生物质提取部位和生测方法
• 5.2 苦瓜次生物质的提取与分离
• 5.3 苦瓜在害虫种群控制中的应用前景和尚需进一步研究的工作
• 致谢
• 参考文献
• 附录
• 附录1:不同作物糖和蛋白质含量光密度值
• 附录2:不同提取物对黄足黑守瓜成虫取食影响
• 附录3:苦瓜正己烷提离子图和苦瓜叶SPME
• 攻读硕士学位期间发表的论文