大豆提取物中异黄酮成分的分离与纯化

论文摘要

大豆异黄酮是大豆中的主要功效成分，具有降胆固醇、抗防骨质疏松、缓解更年期综合症等多种生理活性和药理功效，可广泛应用于药品、保健食品及饮料添加剂中。本论文对市售大豆异黄酮提取物中各种异黄酮成分进行进一步分离纯化的工艺方法和条件进行了研究。1、建立了一种利用大孔吸附树脂分离纯化四种主要的大豆异黄酮的方法。样品采用HPD-100树脂吸附后用20、25、35、45和70％的乙醇溶液梯度洗脱分离四种主要大豆异黄酮。大豆苷、染料木苷、大豆苷元和染料木素产品纯度分别为49.31、60.38、19.33和8.14％。该方法适用于对四种主要大豆异黄酮成分进行初步分离。2、建立了一种微波快速水解大豆异黄酮糖苷的方法，探讨了大豆异黄酮微波水解的条件，并对各种条件进行了优化。与传统回流水解方法进行比较，该方法能简单，快速，高效水解大豆异黄酮，运用该方法能快速制备大豆异黄酮苷元。3、建立了制备型高效液相色谱制备大豆苷元、染料木素单体的方法，对制备流动相配比、流速、样品上样量等制备条件进行了优化。且该方法具有生产周期短、产品质量高、方法简便等特点，产品可作为中药药效物质基础研究中的对照品。4、建立了一种仅用水作为溶剂分离大豆异黄酮苷和苷元的方法，分别对所用溶剂、提取温度、提取时间和物料比进行了优化。实验上清液干燥后的固形物中大豆异黄酮苷含量为32.24％，苷元含量仅为3.05％，沉淀中大豆异黄酮苷元含量为72.03％，苷含量仅为4.28％。该方法经济、简单、绿色无毒，适合工业生产。

论文目录

• 中文摘要
• ABSTRACT
• 第一章 绪论
• 1.1 大豆异黄酮的结构
• 1.2 大豆异黄酮的性质
• 1.2.1 大豆异黄酮的物理性质
• 1.2.2 大豆异黄酮的化学性质
• 1.2.2.1 显色反应
• 1.2.2.2 苷的水解
• 1.3 大豆异黄酮的提取和分离
• 1.3.1 大豆异黄酮的提取工艺
• 1.3.2 大豆异黄酮的分离与纯化
• 1.3.2.1 大孔吸附树脂分离与纯化大豆异黄酮
• 1.3.2.3 沉淀法分离大豆异黄酮
• 1.3.2.4 溶剂法分离大豆异黄酮
• 1.3.2.5 色谱法分离大豆异黄酮
• 1.4 选题的依据和意义
• 第二章 大孔吸附树脂分离纯化四种主要大豆异黄酮
• 2.1 前言
• 2.2 实验部分
• 2.2.1 仪器、色谱条件、材料和试剂
• 2.2.2 大豆异黄酮的检测
• 2.2.3 大孔吸附树脂前处理和样品上样
• 2.2.4 四种大豆异黄酮分离洗脱条件的初步探讨
• 2.2.5 最大上样量的考察
• 2.2.6 洗脱曲线的绘制和洗脱工艺的考察
• 2.3 结果与讨论
• 2.3.1 上样方法的选择
• 2.3.2 洗脱溶剂的初步选择结果
• 2.3.3 最大上样量的选择结果
• 2.3.4 洗脱工艺的选择
• 2.4 结论
• 第三章 微波法快速水解大豆异黄酮糖苷
• 3.1 前言
• 3.2 实验部分
• 3.2.1 仪器、色谱条件、材料和试剂
• 3.2.3 数据处理相关计算公式
• 3.3 结果与讨论
• 3.3.1 水解溶剂的选择
• 3.3.2 最佳微波功率的选择
• 3.3.3 固液比的优化
• 3.3.4 盐酸加入量的优化
• 3.3.5 与传统酸回流水解方法比较
• 3.4 结论
• 第四章 高效液相色谱法制备大豆素和染料木素
• 4.1 前言
• 4.2 仪器与试剂
• 4.3 样品的分析和峰确认
• 4.3.1 分析色谱条件
• 4.3.2 色谱峰的确认
• 4.4 制备条件
• 4.4.1 样品前处理
• 4.4.2 制备色谱条件
• 4.5 结果与讨论
• 4.5.1 检测波长的选择
• 4.5.2 溶剂的选择
• 4.5.3 流动相的选择
• 4.5.4 最佳进样量的选择
• 4.5.5 最佳流速的选择
• 4.5.6 产品收率分析
• 4.5.7 单体纯度的鉴定和光谱波谱分析
• 4.6 结论
• 第五章 大豆异黄酮苷和苷元的“绿色”分离方法研究
• 5.1 前言
• 5.2 实验部分
• 5.2.1 仪器、材料和试剂
• 5.2.2 实验方法
• 5.3 结果与讨论
• 5.3.1 分离溶剂的选择
• 5.3.2 提取分离温度的选择
• 5.3.3 提取分离时间的选择
• 5.3.4 物料比的优化
• 5.3.5 工艺的放大及重复性考察
• 5.4 大豆苷元的制备
• 5.4.1 不同溶剂的选择
• 5.4.2 提取液稀释加速沉淀的考察
• 5.5 结论
• 参考文献
• 附录1 攻读学位期间发表的相关论文
• 致谢