论文摘要
猪传染性胸膜肺炎（Porcine Pleuropneumonia）是由胸膜肺炎放线杆菌（Actinobacillus Pleuropneumoniae, APP）引起的一种常见的呼吸道传染病,各年龄的猪只均可感染。猪群感染胸膜肺炎放线杆菌后,当遇到气候环境突变,通风不良等应激因素时,猪只抵抗力下降,可诱发本病,主要表现为精神沉郁,体温升高,呼吸困难等临床症状,并出现特征性的出血性肺炎和胸膜炎。本病在世界各养猪国家普遍存在,近年来,流行日趋严重,成为大规模养猪的五大疫病之一。采用酚-水法制备血清3型、4型、5型、7型和8型猪胸膜肺炎放线杆菌（APP）脂多糖（LPS）,以该多糖免疫小白鼠,进行同源攻毒保护试验,结果LPS在20μg/只的免疫剂量下可对小白鼠产生较强的保护作用,用同血清型菌株对免疫后的小白鼠攻毒,仅表现肺脏轻微出血,无死亡,而对照组未经免疫直接攻毒的小白鼠全部死亡,肺脏严重出血,上述结果表明LPS是APP的主要免疫保护性抗原之一,该研究为APP亚单位疫苗的研制及应用提供了理论依据。将提纯的血清5型和7型APP脂多糖作为包被抗原,包被后37℃1h转入4℃过夜包被效果较好;封闭后以37℃1h、血清加入后以37℃1h、酶标抗体加入后以37℃1h反应,效果较为理想,依此建立起血清5型和7型APP型特异性间接ELISA检测方法。用血清5型APP型特异性间接ELISA方法检测攻毒小鼠血清抗体,除发病后第2d、第3d死亡的2只未检出抗体外,其余33只至死亡前检测结果全部为阳性,检出率94.3%;用血清7型APP型特异性间接ELISA方法检测攻毒小鼠血清抗体除发病后第2d、第3d死亡的3只未检出抗体外,其余32只至死亡前检测结果全部为阳性,检出率91.4%。用血清5型和7型LPS包被酶标反应板,用其他血清型的阳性血清进行检测,发现OD值都小于0.050,结果均为阴性,没有交叉反应。用血清5型和7型APP型特异性间接ELISA方法分别对6份血清在不同时间相同条件下检测3次,判定结果完全相同,以上研究表明该方法具有很高的敏感性、特异性和重复性。
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标签：胸膜肺炎放线杆菌论文; 脂多糖论文; 免疫原性论文;