应用分子系统学方法对我国部分地区嗜尸性蝇类种属鉴定的研究

论文摘要

本研究利用现代分子生物学的研究手段和方法研究分析了我国六省区家蝇ITS2基因序列;用ISSR分子标记方法对我国10个城市和地区的常见嗜尸性蝇类进行了种属鉴定的研究;研究分析了家蝇的种特异性片段SCAR序列。研究以北京、吉林、长春、成都、南京、广州、荆州和本室养殖家蝇基因组为模板,通过PCR方法扩增了ITS2基因,构建了pMD 18-T-ITS2重组质粒,通过克隆和测序得到了上述六个城市和地区的ITS2基因序列全长,序列大小在353bp-372bp范围,ITS2基因的SSCP和序列分析结果显示:不同地区家蝇ITS2基因有明显的序列差异,存在种内丰富多态性;ITS2基因可以作为家蝇种内鉴定和近缘种分析的一种分子标记方法。采用ISSR分子标记技术对我国10个城市和地区常见5种法医重要蝇类进行了种属鉴定研究,共设计22个ISSR引物,从中筛出8个特异性强的ISSR引物进行蝇类的鉴定,结果揭示我国10个城市与地区的家蝇存在种内基因型差异和遗传多态性;不同地区的大头金蝇、丝光绿蝇亦存在种内基因型与地理株基因组DNA的差异;找到了几种嗜尸性蝇类种特异性带谱。发现了家蝇种特异性Marker,研究以实验室养殖家蝇基因组为模板扩增出家蝇种特异性片段,将这一片段转化为SCAR标记物,构建了pMD 18-T-SCAR重组质粒,克隆测序得到了家蝇SCAR基因序列,序列全长为500bp,为家蝇快速准确鉴定找到了最新方法,同时也为家蝇分子分类的进一步研究奠定理论基础。总之,研究工作为嗜尸性蝇类的分类鉴定提供重要分子生物学依据,为法医检案提供新思路和新方法。

论文目录

• 内容提要
• 前言
• 第一篇 文献综述
• 第一章 分子标记技术在蝇类研究中的应用
• 1 DNA分子标记技术简介
• 2 DNA分子标记技术在蝇类研究中的应用
• 3 展望
• 第二章 分子系统学在嗜尸性蝇类研究中的应用
• 1 分子系统学概况
• 2 研究内容
• 3 分子系统学方法
• 4 rDNA-ITS2在蝇类分子系统学研究中的应用
• 第二篇 研究内容
• 第一章 我国六省区家蝇 rDNA-ITS2基因的 SSCP与序列分析
• 1 材料与方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 4 小结
• 第二章 基于 ISSR分子标记技术对我国部分城市地区常见嗜尸蝇类种属鉴定的研究
• 1 材料与方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 4 小结
• 第三章 家蝇 SCAR基因序列的研究
• 1 材料与方法
• 2 结果
• 3 分析
• 4 小结
• 总结
• 附录
• 参考文献
• 攻读博士学位期间发表的学术论文及其他成果
• 中文摘要
• Abstract
• 致谢
• 导师简介