NF-κB抑制剂在雌激素调节BSEP及NTCP表达中的作用

论文摘要

目的：研究不同浓度17β雌二醇（E2）对L-02人正常肝细胞胆盐输出泵（BSEP）及钠-牛磺胆酸盐共转运多肽（NTCP）表达的影响以及核因子-κB （NF-κB）抑制剂吡咯烷二硫氨基甲酸盐（PDTC）在雌激素调节肝细胞BSEP及NTCP表达中的作用。方法：采用体外培养人肝细胞株（L-02）,以相同浓度雌激素作用不同时间,不同浓度雌激素作用相同时间,以得出最适诱导时间及浓度。随后以雌激素作用组细胞为雌激素对照组,以不同浓度PDTC联合雌激素诱导组为实验组,诱导24小时候后,采集孔内培养基检测其中胆汁酸浓度,应用逆转录-PCR （RT-PCR）方法检测肝细胞表面BSEP及NTCP mRNA的含量。结果：（1）雌激素作用后6h、12h、18h、24h、30h及36h时BSEP及NTCP表达较对照组降低,但6-24h各组间胆汁酸变化无统计学意义（P>0.05）,24h和30h组间胆汁酸浓度变化有统计学意义（P<0.05）,30h和36h之间没有统计学意义（P>0.05）。（2）不同浓度雌激素作用肝细胞相同时间（24h）,生理浓度雌激素时胆汁酸较空白对照无明显降低,BSEP及NTCP表达较正常对照无明显下降,无统计学意义（P>0.05）；高浓度雌激素组（100,500 nmol/L）胆汁酸浓度、BSEP及NTCP表达较对照组及生理浓度雌激素组下降（P<0.05）,且各组间比较有统计学意义,且与浓度呈量效依赖关系（R=-0.889,R=-0.884）。1000 nmol/L雌激素作用组与500 nmol/L雌激素作用组之间胆汁酸浓度、BSEP及NTCP表达无明显变化,无统计学意义（P>0.05）。（3）PDTC联合雌激素作用组胆汁酸浓度、BSEP及NTCP表达较单独雌激素组明显升高,有统计学意义（P<0.05）, PDTC联合雌激素作用组各组间结果有统计学意义（P<0.05）。结论：（1）生理浓度雌激素不引起BSEP及NTCP表达下降,高于生理浓度雌激素可引起BSEP及NTCP表达下降,且呈剂量依赖关系。（2）NF-κB可能参与雌激素对于BSEP及NTCP的调控,雌激素可能通过NF-κB介导途径对BSEP及NTCP的表达起负调节作用。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 缩写词中英文对照
• 前言
• 第一章 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 实验仪器
• 1.3 实验试剂
• 1.4 主要试剂的配制
• 1.5 药物配置
• 1.6 细胞培养
• 1.7 预实验
• 1.8 实验分组
• 1.9 RNA提取
• 1.10 逆转录
• 1.11 PCR扩增
• 1.12 凝胶电泳成像
• 1.13 统计分析
• 第二章 结果
• 第三章 讨论
• 第四章 结论
• 参考文献
• 综述
• 致谢