耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌SCCmec分型及PVL基因的表达

耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌SCCmec分型及PVL基因的表达

论文摘要

目的:分析我院MRSA分布特点及耐药情况,检测MRSA的杀白细胞素(Panton-ValentinePVL)基因携带率和SCCmec基因分型,比较CA-MRSA与HA-MRSA之间有无差别,初步了解我院MRSA分子生物学流行性特征,从而进一步指导临床治疗MRSA,指导临床用药,更好地控制MRSA引起的感染,并减少耐药株的出现。方法:以我院2005年9月至2006年9月各临床科室的MRSA菌株共65株为研究对象,用琼脂平皿二倍稀释法测定其对苯唑西林、利福平、莫昔沙星、头孢硫米、阿米卡星、磺胺甲(口恶)唑、万古霉素、克林霉素8种药物对其的最低抑菌浓度(MIC)。采用碱裂解法提取细菌总DNA,应用PCR扩增技术,检测mecA及PVL基因,在使用多重PCR扩增技术检测SCCmec基因分型,PCR产物进行琼脂糖电泳凝胶检测,各选取一株阳性株进行基因测序。结果:65株MRSA主要分布在ICU(15.1%)、神经外科(15.1%)、神经内科(12.1%)、呼吸内科(12.1%)、皮肤科(12.1%)、感染科(9.1%)。标本主要来源于痰液者47株(73.8%),皮肤软组织分泌物11株。65株MRSA对利福平、莫昔沙星、头孢硫米、磺胺甲(口恶)唑、克林霉素的耐药率均较高,分别为:89.2%、92.3%、83.1%,96.9%、86.1%对阿米卡星耐药率相对较低,为55.3%。CA-MRSA的耐药率低于HA-MRSA。65株MRSA PVL基因阳性率为16.9%,其中3株分离自皮肤软组织分泌物(27.3%),1株来源于腹腔引流液(7.7%),其余9株分离自痰液(69.2%)其中CA-MRSA4株,占所有CA-MRSA的30.8%,HA-MRSA7株,占所有HA-MRSA的13.5%。65株MRSA的SCCmec基因分型均为Ⅲ型。结论:MRSA对多种抗生素耐药率均较高,且多数菌株表现为多重耐药,尚未发现对万古霉素耐药的菌株。目前,万古霉素仍然是治疗MRSA的首选药物,阿米卡星耐药率相对较低,可作为辅助治疗药物。我院MRSA菌株PVL携带率较高,其中CA-MRSA携带率高于HA-MRSA。SCCmec基因分型单一,均为SCCmec-Ⅲ型,CA-MRSA与HA-MRSA基因型一致,有可能这些CA-MRSA事实上来自于HA-MRSA,或者二者在个别基因位点上不尽相同。

论文目录

  • 缩略词表
  • 中文摘要
  • 英文摘要
  • 前言
  • 试验流程图
  • 一、材料和方法
  • 1.材料
  • 2.方法
  • 2.1 菌株收集鉴定
  • 2.2 PCR检测MEC基因
  • 2.3 琼脂稀释法(MIC)测定细菌敏感性
  • 2.4 PCR检测PVL基因
  • 2.5 PCR检测SCCmec基因
  • 二、结果
  • 1.MRSA的药敏结果
  • 2.PCR扩增产物的电泳结果
  • 3.基因测序结果
  • 三、讨论
  • 1.MRSA耐药特点
  • 1.PVL基因与MRSA感染
  • 3.SCCmec基因分型
  • 四、结论
  • 参考文献
  • 综述
  • 致谢
  • 附录
  • 相关论文文献

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