王彤:毕赤酵母Kex2蛋白酶的同源表达及酶学性质论文

王彤:毕赤酵母Kex2蛋白酶的同源表达及酶学性质论文

本文主要研究内容

作者王彤,徐岩,喻晓蔚(2019)在《毕赤酵母Kex2蛋白酶的同源表达及酶学性质》一文中研究指出:Kex2蛋白酶是一种来源于酵母的前体加工蛋白酶。利用毕赤酵母(Pichia pastoris)同源表达来源于毕赤酵母的Kex2蛋白酶(PPKex2),研究其表达特性和酶学性质,同时与毕赤酵母表达的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae) Kex2蛋白酶(SCKex2)进行比较。首先,分别从毕赤酵母和酿酒酵母基因组中获得Kex2基因,将其插入到表达载体p PIC9K中,并转化毕赤酵母菌株GS115。重组菌株经甲醇诱导表达后,结果表明PPKex2的发酵上清液比活是SCKex2的7倍。Kex2蛋白酶经Q-FF强阴离子交换柱纯化后进行酶学性质研究。酶学性质研究结果表明,PPKex2的最适反应pH是8. 0~9. 0,最适反应温度是37℃,与SCKex2性质相近。在稳定性方面,PPKex2在pH 7. 0时最稳定,在碱性条件下的稳定性高于SCKex2,在酸性条件下的稳定性低于SCKex2,另外PPKex2的温度稳定性略低于SCKex2。酶促反应动力学研究表明,PPKex2的kcat和kcat/Km值分别为SCKex2的4. 8倍和3. 3倍。首次报道了同源表达毕赤酵母Kex2蛋白酶的表达特性及酶学性质,为其今后的研究及应用奠定了基础。

Abstract

Kex2dan bai mei shi yi chong lai yuan yu jiao mu de qian ti jia gong dan bai mei 。li yong bi chi jiao mu (Pichia pastoris)tong yuan biao da lai yuan yu bi chi jiao mu de Kex2dan bai mei (PPKex2),yan jiu ji biao da te xing he mei xue xing zhi ,tong shi yu bi chi jiao mu biao da de niang jiu jiao mu (Saccharomyces cerevisiae) Kex2dan bai mei (SCKex2)jin hang bi jiao 。shou xian ,fen bie cong bi chi jiao mu he niang jiu jiao mu ji yin zu zhong huo de Kex2ji yin ,jiang ji cha ru dao biao da zai ti p PIC9Kzhong ,bing zhuai hua bi chi jiao mu jun zhu GS115。chong zu jun zhu jing jia chun you dao biao da hou ,jie guo biao ming PPKex2de fa jiao shang qing ye bi huo shi SCKex2de 7bei 。Kex2dan bai mei jing Q-FFjiang yin li zi jiao huan zhu chun hua hou jin hang mei xue xing zhi yan jiu 。mei xue xing zhi yan jiu jie guo biao ming ,PPKex2de zui kuo fan ying pHshi 8. 0~9. 0,zui kuo fan ying wen du shi 37℃,yu SCKex2xing zhi xiang jin 。zai wen ding xing fang mian ,PPKex2zai pH 7. 0shi zui wen ding ,zai jian xing tiao jian xia de wen ding xing gao yu SCKex2,zai suan xing tiao jian xia de wen ding xing di yu SCKex2,ling wai PPKex2de wen du wen ding xing lve di yu SCKex2。mei cu fan ying dong li xue yan jiu biao ming ,PPKex2de kcathe kcat/Kmzhi fen bie wei SCKex2de 4. 8bei he 3. 3bei 。shou ci bao dao le tong yuan biao da bi chi jiao mu Kex2dan bai mei de biao da te xing ji mei xue xing zhi ,wei ji jin hou de yan jiu ji ying yong dian ding le ji chu 。

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  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自中国生物工程杂志的王彤,徐岩,喻晓蔚,发表于刊物中国生物工程杂志2019年01期论文,是一篇关于毕赤酵母论文,同源表达论文,酶学性质论文,中国生物工程杂志2019年01期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自中国生物工程杂志2019年01期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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