论文摘要
指纹图谱是指某种（或某产地）中药材或中成药中所共有的、具有特异性的某类或数类成分的色谱或光谱的图谱。其特点在于：通过指纹图谱的特异性,能有效鉴别样品的真伪或产地；及通过指纹图谱主要特征峰的含量或比例的制定,能有效控制样品的质量,确保样品质量的相对稳定。因此,在有效成分不完全明确的前提下,特定中药材或中成药的特征指纹图谱,对于有效地控制中药材或中成药的质量,具有重要的意义。目前指纹图谱已成为国际公认的控制中药或天然药物质量的最有效手段。当前,国内外认可和研究较多的为高效液相色谱指纹图谱,它是现在应用最多的一类,具有分离效能高,分析速度快等优点。如运用DAD检测器,可得到三维图谱,因而适用于成分比较复杂且在紫外光区有吸收的药物的分析。其它指纹图谱技术的发展,也将对中药质量控制有深远的意义,现仅就中药材HPLC指纹图谱做一探讨。黄芩是我国著名的传统中药,是唇形科植物黄芩的干燥根。最早收载于《神农本草经》,列为草根药的上品。它含黄酮类、谷甾醇、苯甲酸、黄芩酶、淀粉等,其主要有效成份是黄酮类化合物,迄今已分离出约40种黄酮,如黄芩苷、黄芩素、汉黄芩苷、汉黄芩素、白杨素、千层纸素A等。黄芩性寒,味苦归肺胆胃大肠经。具有清热燥湿、泻火解毒、止血安胎等功效,可用于湿热泻痢、肺热咳嗽、热病烦渴、黄疸、目赤肿痛、积热吐血、胎动不安、痛肿疮疖等症。它具有多种药理作用,近年来国际上对黄芩的研究呈上升趋势。河北是黄芩的道地产区,其药效学实验显示其某些疗效确实较好。并以河北承德产黄芩质量最佳,被称为“热河黄芩”。连翘败毒片为传统的清热解毒、消肿止痛中药,临床主治疮疖溃烂、灼热发烧、流脓流水、丹毒疱疹、疥癣疼痒等症。近也有报道其具有抗内毒素及提高机体细胞免疫、体液免疫的作用。目的：1、建立河北省8个不同产地野生黄芩药材的指纹图谱,并进一步建立河北省黄芩药材的质量控制标准图谱体系。2、建立13个不同产地黄芩药材指纹图谱,分析其共有性和特异性,为鉴定黄芩的种源和质量提供依据。3、测定不同直径黄芩药材黄芩苷含量,分析黄芩苷含量与黄芩直径的关系,为鉴定野生黄芩的生长期提供依据。4、对黄芩复方制剂连翘败毒片做指纹图谱分析,并检测黄芩苷的含量,建立其质量控制标准。方法：1、采用水煎回流提取法对不同产地的黄芩药材进行提取,以四元流动相色谱检测体系,建立各黄芩样品的HPLC指纹图谱。2、采用多指标分析,对黄芩多种有效成分进行含量检测,并通过方法学验证,建立黄芩的质量评价体系。3、采用居群取样,对13个不同产地的每个产地的10-24个取样点的每根黄芩药材做指纹图谱分析,采用高相液相色谱法对不同产地黄芩药材做指纹图谱鉴别。4、对黄芩复方制剂连翘败毒片采用和黄芩一样的检测体系,建立10批样品的指纹图谱,并对其黄芩苷成分做含量测定,并通过方法学验证,建立连翘败毒片的质量评价体系。结果：1、在黄芩药材的指纹图谱中,70分钟内分离出15个共有指纹峰,其中8号是黄芩苷,12号是汉黄芩苷,13号是黄芩素,14号是汉黄芩素,15号是千层纸素A。2、8批河北不同产地的黄芩药材的共有峰的分离度良好,保留时间稳定,重现性好,且在不同种群间相互吻合较好,其对照指纹图谱按面积归一化法计算,15个共有峰的面积占总峰面积百分比分别为0.076%,0.176%,1.651%,0.941%,0.904%,0.202%,1.063%,60.519%,3.131%,8.986%,13.054%,3.481%,0.105%,2.360%和0.899%。故可作为河北省黄芩的特征指纹。3、河北围场城边山上的黄芩药材的指纹图谱在保留时间4.4分钟有明显的指纹峰,峰高与参比峰汉黄芩苷比较大体是1：3,而其它各产地黄芩的指纹图谱在此保留时间无信号。4、黄芩药材直径与黄芩苷含量关系分析结果证明,随黄芩药材直径的增大,黄芩苷的含量逐渐降低。5、在连翘败毒片的指纹图谱中,70分钟分离出13个共有指纹峰,其中8号峰为黄芩苷,其黄芩苷的平均含量是4.36mg/片。结论：1、河北围场城边山上的黄芩药材的指纹图谱具有一个特异指纹峰,而其他各产地黄芩药材指纹图谱无此峰,仅其它特征峰的峰高比例有明显差异。2、随黄芩药材直径的增大,黄芩苷的含量逐渐降低,黄芩苷含量可作为判断黄芩生长期的一个因素。3、本文所建立的连翘败毒片的指纹图谱,以黄芩苷为参比峰,可作为连翘败毒片质量控制指标之一。
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