白藜芦醇与γ-倒捻子素的结构改造和抗肿瘤活性及油茶皂苷的提取、纯化的研究

论文摘要

油茶皂苷是从油茶饼粕中提取出来的五环三萜类混合物,其结构是由皂苷配基、糖体和有机酸三部分组成。研究表明：油茶皂苷是一种性能优良的非离子型天然表面活性剂,并具有溶血性、抗渗消炎、化痰止咳、镇痛、抗菌、抗癌等许多生物活性,广泛应用于建材、日用化工、农药行业及食品工业。本文致力于天然产物的提取分离与结构改造及其生物活性的研究。首先探讨了油茶粕中油茶皂苷的提取分离工艺,对现有的油茶皂苷分离提取工艺进行改进,提出了先后使用大孔树脂,聚酰胺树脂及Sephadex LH-20凝胶柱进行分离,并使用比色法对产品进行测定,得到了较纯的油茶皂苷产品。其次,我们以天然提取的白藜芦醇及γ-倒捻子素为原料,对其结构进行修饰改造,合成了5个化合物,用1H NMR对其进行了结构表征。将合成的新化合物进行抗肿瘤生物活性试验的研究,在此基础上讨论了化合物与抗肿瘤活性之间的构效关系。本论文的主要研究内容归纳为如下几个方面：1.在查阅了大量文献的基础上,全面系统的归纳了油茶皂苷的提取分离工艺及白藜芦醇与γ-倒捻子素及其衍生物的研究现状和其药理活性。2.以江西产的油茶粕为原料,用70%乙醇,料液比1：5（w/v）,在60℃下浸提3h,将提取出的油茶皂苷粗品经大孔树脂,聚酰胺树脂及Sephadex LH-20凝胶柱进行分离。并探讨了溶剂、流速、不同洗脱方案等分别对大孔树脂,聚酰胺树脂及Sephadex LH-20凝胶柱分离纯化油茶皂苷的影响。3.分别以白藜芦醇和γ-倒捻子素为母体,根据其官能团特点,设计合成了4个白藜芦醇的衍生物及1个γ-倒捻子素衍生物。由于白藜芦醇和γ-倒捻子素的酚羟基具有很强的供电子能力,这可能是其具有抗氧化能力的主要原因,于是对其上的酚羟基进行结构修饰,合成的新化合物分别通过1HNMR分别确定了它们的结构。4.以阿霉素和他莫西芬为对照物,采用MTT法对白藜芦醇及γ-倒捻子素衍生物抗肿瘤活性进行首次测试。实验结果表明：对比于其它的白藜芦醇衍生物,化合物TY-1对肿瘤细胞MCF-7和A549的抗癌活性最佳,IC50值分别是6.05umol/L和8.27umol/L,化合物TY-2对HepG2癌细胞株抗癌效果最好,它IC50值是8.71umol/L。对γ-倒捻子素衍生物,当γ-倒捻子素的2,3,6位上的酚羟基上的氢全部被苄基取代时,其生物活性不显著。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第1章 绪论
• 1.1 白藜芦醇研究概况
• 1.1.1 白藜芦醇的理化性质及来源
• 1.1.2 白藜芦醇类化合物的生物活性及药理作用
• 1.2 倒捻子素的研究概况
• 1.2.1 倒捻子素的植物来源
• 1.2.2 倒捻子素的生物活性研究
• 1.3 油茶皂苷研究概况
• 1.3.1 油茶皂苷结构
• 1.3.2 油茶皂苷的理化性质
• 1.3.3 油茶皂苷的光谱特征
• 1.3.4 油茶皂苷的颜色反应
• 1.3.5 油茶皂苷的提取方法
• 1.3.6 油茶皂苷的纯化方法
• 1.3.7 油茶皂苷得到生物活性
• 第二章 白藜芦醇与Γ-倒捻子素的结构改造研究
• 2.1 目标化合物的设计思想与合成路线
• 2.1.1 设计思想
• 2.1.2 合成路线
• 2.2 实验部分
• 2.2.1 实验仪器和实验药品
• 2.2.2 实验操作、结果及数据
• 2.3 实验结果与讨论
• 2.3.1 白藜芦醇衍生物TY-1～TY4的合成机理
• 2.3.2 合成化合物TY-5的最佳工艺条件探索
• 2.4 小结
• 第三章 白藜芦醇及Γ-倒捻子素衍生物抗肿瘤活性研究
• 3.1 引言
• 3.2 本论文研究内容
• 3.3 实验部分
• 3.3.1 实验材料与试剂
• 3.3.2 实验仪器
• 3.3.3 实验方法
• 3.4 结果与讨论
• 3.4.1 异戊烯基团对白藜芦醇抗肿瘤活性的影响
• 3.4.2 γ-倒捻子素的苄基衍生物抗癌活性分析
• 3.5 小结
• 第四章 油茶饼粕中油茶皂苷的提取分离研究
• 4.1 前言
• 4.2 实验试剂与仪器
• 4.2.1 实验试剂
• 4.2.2 实验仪器
• 4.3 实验方法
• 4.3.1 油茶皂苷的提取与分离
• 4.3.2 油茶皂苷含量测定
• 4.3.3 大孔树脂法纯化油茶皂苷
• 4.3.4 聚酰胺层析法纯化油茶皂苷
• 4.3.5 凝胶柱层析法纯化油茶皂苷
• 4.3.6 Sephadex LH-20对黄酮类物质分离的HPLC跟踪
• 4.3.7 经Sephadex LH-20分离后油茶总皂苷的LC-MS分析
• 4.4 实验结果与讨论
• 4.4.1 油茶皂苷含量的测定
• 4.4.2 大孔树脂纯化油茶皂苷的研究
• 4.4.3 聚酰胺树脂纯化油茶皂苷的研究
• 4.4.4 Sephadex LH-20凝胶柱纯化油茶皂苷的研究
• 4.5 小结
• 4.5.1 油茶皂苷的测定
• 4.5.2 乙醇法提取油茶皂苷
• 4.5.3 大孔树脂纯化油茶皂苷
• 4.5.4 聚酰胺树脂纯化油茶皂苷
• 4.5.5 Sephadex LH-20凝胶柱纯化油茶皂苷
• 第五章 总结与工作展望
• 5.1 总结
• 5.2 工作展望
• 致谢
• 参考文献
• 附图目录