论文摘要
第一部分SAP大鼠血清IL-18与免疫损害和多脏器病理改变的关系目的:探讨SAP大鼠血清IL-18与IL-1β的相关关系;研究IL-18与脾淋巴细胞凋亡和FasL、Bcl-2 mRNA表达的相关关系;分析SAP时IL-18与免疫损害和多脏器病理改变的关系。方法:健康Wistar大鼠16只,随机分为两组:空白对照组（6只）和SAP模型组（10只）。采用5%牛黄胆酸钠胆胰管内逆行注入的方法诱导SAP大鼠模型,观察两组大鼠24小时死亡率;两组大鼠于术后24小时股动脉取血,检测血清IL-18、IL-1β水平;取脾组织分离淋巴细胞,应用流式细胞仪检测淋巴细胞凋亡率,RT-PCR检测淋巴细胞FasL、Bcl-2 mRNA的表达;留取胰腺、肺、肝、肾行组织病理学检查。结果:SAP模型组大鼠多脏器病理评分、血清IL-18和血清IL-1β明显高于对照组（P＜0.01）,血清IL-18与IL-1β和多脏器病理评分成正相关关系（r=0.886和r=0.807,P＜0.01）;脾淋巴细胞凋亡率和FasL mRNA表达明显高于对照组（P＜0.01）,Bcl-2mRNA表达明显低于对照组（P＜0.01）;SAP时血清IL-18与脾淋巴细胞凋亡率和FasL mRNA表达成正相关关系（r=0.650和r=0.713,P＜0.05）,与Bcl-2 mRNA表达成负相关关系（r=0.836,P＜0.01）。结论:SAP时,IL-18和IL-1β相互诱生,共同参与全身性炎症反应,从而加重多脏器病理损害;在SAP早期即存在淋巴细胞过度凋亡,这可能是导致SAP早期即出现免疫抑制的重要原因之一,脾淋巴细胞FasL mRNA的过表达和Bcl-2 mRNA的表达不足,可能是脾淋巴细胞过度凋亡的重要途径之一;IL-18可能通过上调淋巴细胞FasL mRNA的表达和下调Bcl-2 mRNA的表达,从而影响淋巴细胞过度凋亡。第二部分中药对SAP大鼠免疫和多脏器病理改变的调控作用目的:探讨中药莱菔承气汤、参芪扶正注射液对SAP大鼠血清细胞因子、脾淋巴细胞凋亡率、凋亡相关基因以及多脏器病理损害的影响,分析中药莱菔承气汤、参芪扶正注射液对SAP大鼠免疫和多脏器病理改变的调控作用。方法:健康Wistar大鼠36只,随机分为四组:空白对照组（K组,6只）、SAP模型组（M组,10只）、莱菔承气汤治疗组（L组,10只）和参芪扶正注射液治疗组（S组,10只）。M组、L组和S组均采用5%牛黄胆酸钠胆胰管内逆行注入的方法制作SAP动物模型。L组和S组均按2.5ml中药/100g体重,分两次分别于造模后8h和16h灌胃;K组和M组于相同时间点给予等量生理盐水灌胃。观察各组大鼠24小时死亡率;各组大鼠于术后24小时股动脉取血,检测血清IL-18、IL-1β水平;取脾组织分离淋巴细胞,应用流式细胞仪检测淋巴细胞凋亡率,RT-PCR检测淋巴细胞FasL、Bcl-2 mRNA的表达;留取胰腺、肺、肝、肾行组织病理学检查。结果:莱菔承气汤治疗组大鼠血清IL-18、IL-1β、多脏器病理评分、脾淋巴细胞凋亡率和FasL mRNA表达均低于SAP模型组（P＜0.05或P＜0.01）,但仍高于对照组（P＜0.01）;Bcl-2 mRNA表达高于SAP模型组（P＜0.01）,但仍低于对照组（P＜0.01）。参芪扶正注射液治疗组大鼠血清IL-18、IL-1β、多脏器病理评分、脾淋巴细胞凋亡率和FasL mRNA表达均低于SAP模型组（P＜0.01）,但仍高于对照组（P＜0.05或P＜0.01）:Bcl-2 mRNA表达高于SAP模型组（P＜0.01）,但仍低于对照组（P＜0.05）。结论:莱菔承气汤能明显下调SAP大鼠血清IL-18和IL-1β的表达,明显减轻多脏器病理损害,进一步证实了莱菔承气汤对SAP的治疗作用。莱菔承气汤能下调脾淋巴细胞FasL mRNA的表达和上调Bcl-2 mRNA的表达,可能是其减少淋巴细胞凋亡的重要途径之一。在SAP早期应用补气养血中药参芪扶正注射液,也能下调SAP大鼠血清IL-18和IL-1β的表达,减轻多脏器病理损害,初步证实了参芪扶正注射液对SAP的治疗作用。参芪扶正注射液能够减少脾淋巴细胞凋亡,可能也是通过下调脾淋巴细胞FasL mRNA的表达和上调Bcl-2 mRNA的表达来实现的。但这两种中药对SAP免疫功能的影响尚需临床治疗进一步验证。
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