论文摘要
1、目的和意义肝硬化是我国常见疾病和主要死亡原因之一。临床上以肝功能损害和门静脉高压为主要表现，晚期常出现消化道出血、肝性脑病、继发感染等严重并发症。肝纤维化是肝硬化的早期改变，因各种原因引起的肝细胞脂肪变、坏死及炎症等，在坏死区发生胶原纤维增生，因肝细胞坏死，局部的网状纤维支架塌陷，网状纤维融合成胶原纤维，初期增生的纤维组织虽形成小的条索，但尚未连接形成间隔而改建肝小叶结构时，称为肝纤维化，为可复性病变。如果在此时消除病因，进行药物治疗，纤维化可以被逐渐吸收。如果继续进展，将形成不可逆转的假小叶。所以早期诊断肝纤维化对病人的治疗及预后有很大帮助。本实验旨在探讨超声弹性成像对早期肝纤维化的诊断价值，为今后研究提供基础资料。2、材料与方法Wistar大鼠30只，体重180—220g。将实验动物分为A、B、C三组，A组为结扎大鼠右侧胆管(包括中叶、右叶、尾状叶)2周后进行检查。B组为结扎大鼠右侧胆管(同A组)1周后进行检查，C组行假手术为对照组。A组大鼠麻醉后，腹部备皮，皮肤常规消毒，腹部横行切开，暴露肝脏、胆总管，游离右侧胆管，结扎，然后关腹；C组，仅开腹然后关腹，即假手术组。A、C两组同批实施手术，A、C两组术后1周，B组实施手术，步骤、方法、部位同A组。于A、C两组术后2周即B组术后1周，三组同批进行超声弹性成像检查，检查后即处死动物，取病变肝组织，置10％的中性福尔马林固定，脱水，石蜡包埋。使用日本日立公司有弹性成像功能的EUB8500超声仪，线阵探头，探头频率为7.5—13.0MHz。将大鼠腹腔麻醉、固定，在超声仪下观察，手持探头轻轻加压，根据仪器指示，使压力始终控制在3左右，调整取样框大小，观察取样框内的颜色变化，蓝色为阳性。统计学方法：使用统计软件SPSS10.0，采用多独立样本的秩和检验。3、结果3．1超声检查情况根据日立公司提供的评分标准，稍做修改，将肝组织弹性无差异，取样框内颜色均为绿色，评为1分；肝组织弹性无明显差异，取样框中颜色为绿色中微微带点蓝色，评为2分；肝组织弹性有差异，取样框内正常肝组织弹性变化为绿色，病变肝组织弹性变化为蓝色，评为3分。检查完毕后解剖大鼠取肝组织送病检。A组中有7例评分为3分，2例2分；B组有4例评分为2分，5例评分为1分，C组中9例1分，1例2分。通过统计得出结果，A组与B、C组之间均有统计学差异，P＜0.0017(两两比较，校正后P值为0.017)。B、C两组之间没有统计学差异，P＞0.017。3．2病理检查情况A组取肝组织经HE染色，在10×20倍光镜下观察，结果显示：汇管区有炎细胞浸润，汇管区与汇管区之间可见桥样坏死，坏死区域之间可见纤维组织形成，有假小叶形成趋势。经Masson染色，在10×20倍的光镜下观察，见纤维组织为绿色。B组取肝组织经HE染色，10×20倍光镜下观察，结果为：胆管扩张，胆汁淤积，肝细胞点状坏死，胆管上皮细胞增生。4、讨论Ophir等1991年最早提出弹性成像这一概念，认为生物组织都具有弹性或硬度这一属性。即便是正常组织之间，不同的解剖结构之间也存在着细微的弹性差异。生物组织的弹性信息对于疾病的诊断具有重要的参考价值。近15年来，弹性成像得到了迅速发展。国内、外将实时超声弹性成像技术应用于乳腺包块良、恶性的鉴别诊断，取得了较好的临床效果。该技术是人为的给组织一定压力，组织在受压后发生形变，仪器把这种形变的差别用不同的彩色显示出来。即最软的组织以红色显示，中间以绿色显示，最硬的显示蓝色。正常肝组织与肝纤维化组织中的弹性是不同的，本研究符合这一改变，3组比较有统计学差异，P＜0.001。但B组与C组之间没有统计学差异，P＞0.017。表明超声弹性成像诊断早期肝纤维化比较敏感，一旦有纤维组织形成，超声弹性成像仪器即能显示出差异。这一结果给予我们极大的鼓舞，使早期诊断肝纤维化有望成为可能。但本研究有着一定的不足之处，首先由于超声仪器的限制，18例造模成功的大鼠的超声图像中，取样框内必须包含正常肝组织与胆管结扎后的肝组织，换句话说，取样框内必须有正常与异常两种组织存在，在一定程度上限制其应用。其次是必须先在二维超声下观察到两者之间的不同，然后才能用弹性成像进行评分，如果组织改变在二维超声上不明显时，也就无所谓弹性的评价了。由于日立公司尚未研制出用于人的肝纤维化的弹性成像的仪器，所以本研究仅限于实验室科研，希望能对日后人体肝纤维化的实时弹性成像的研究提供最初步的数据。本实验中有1例造模没成功，考虑结扎时打结不紧，线头滑脱所致。应该采取胆管两端结扎，中间将胆管剪断为宜。由于实时弹性成像要求取样框内必须同时有病变组织及正常组织，这就要求在二维状态下就要初步判定组织之间的差异，再用弹性成像加以区别。所以这次研究采用部分大鼠肝脏胆管结扎，保证同时有病变及正常肝组织。研究中发现一例肝组织中有一圆形低回声包块，弹性成像显示为绿色，评分为1分，病理结果为肝细胞化脓性变，考虑为手术过程中钝性损伤肝组织，继而局限性感染所致。由此表明化脓性感染所致的组织改变与正常肝组织差异不大，尚不足以被仪器分辨。