胡永新:表达非洲猪瘟病毒P72蛋白复制缺陷型重组腺病毒的构建及鉴定论文

胡永新:表达非洲猪瘟病毒P72蛋白复制缺陷型重组腺病毒的构建及鉴定论文

本文主要研究内容

作者胡永新,赵永刚,张永强,刘拂晓,樊晓旭,吴晓东,王志亮(2019)在《表达非洲猪瘟病毒P72蛋白复制缺陷型重组腺病毒的构建及鉴定》一文中研究指出:本研究旨在构建能够表达非洲猪瘟病毒(ASFV)P72蛋白的缺陷型重组腺病毒。参考ASFV China-SY18株的基因序列,合成B646L基因。先将合成的B646L基因通过TOPO连接克隆到过渡载体pENTR/D-TOPO中;再将插入B646L基因的过渡载体pENTR/D-TOPO-ASFV-P72与pAd/CMV/V5-DEST腺病毒骨架载体进行重组,得到pAd-ASFV-P72重组质粒;重组质粒经PacⅠ酶切线性化后转染293A细胞,连续传代后获得重组腺病毒。结果表明,获得的Ad5-ASFV-P72重组腺病毒的滴度为2.53×109IFU·mL-1;经免疫荧光方法及Western blot鉴定ASFV-P72蛋白在Vero细胞中成功表达,且能够与ASFV标准阳性血清发生特异性反应。本研究成功获得能够表达ASFV P72蛋白的重组腺病毒Ad5-ASFV-P72,不仅为ASFV多基因重组腺病毒载体疫苗的研制奠定了一定基础,还为ASFV相关血清学诊断方法的建立提供了安全有效的抗原。

Abstract

ben yan jiu zhi zai gou jian neng gou biao da fei zhou zhu wen bing du (ASFV)P72dan bai de que xian xing chong zu xian bing du 。can kao ASFV China-SY18zhu de ji yin xu lie ,ge cheng B646Lji yin 。xian jiang ge cheng de B646Lji yin tong guo TOPOlian jie ke long dao guo du zai ti pENTR/D-TOPOzhong ;zai jiang cha ru B646Lji yin de guo du zai ti pENTR/D-TOPO-ASFV-P72yu pAd/CMV/V5-DESTxian bing du gu jia zai ti jin hang chong zu ,de dao pAd-ASFV-P72chong zu zhi li ;chong zu zhi li jing PacⅠmei qie xian xing hua hou zhuai ran 293Axi bao ,lian xu chuan dai hou huo de chong zu xian bing du 。jie guo biao ming ,huo de de Ad5-ASFV-P72chong zu xian bing du de di du wei 2.53×109IFU·mL-1;jing mian yi ying guang fang fa ji Western blotjian ding ASFV-P72dan bai zai Veroxi bao zhong cheng gong biao da ,ju neng gou yu ASFVbiao zhun yang xing xie qing fa sheng te yi xing fan ying 。ben yan jiu cheng gong huo de neng gou biao da ASFV P72dan bai de chong zu xian bing du Ad5-ASFV-P72,bu jin wei ASFVduo ji yin chong zu xian bing du zai ti yi miao de yan zhi dian ding le yi ding ji chu ,hai wei ASFVxiang guan xie qing xue zhen duan fang fa de jian li di gong le an quan you xiao de kang yuan 。

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  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自畜牧兽医学报的胡永新,赵永刚,张永强,刘拂晓,樊晓旭,吴晓东,王志亮,发表于刊物畜牧兽医学报2019年08期论文,是一篇关于非洲猪瘟病毒论文,复制缺陷型腺病毒论文,蛋白论文,畜牧兽医学报2019年08期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自畜牧兽医学报2019年08期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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