论文摘要
本实验应用HPLC-UV和LC-MS/MS方法,对大鼠灌胃给予虎杖（Polygonumcuspidatum Sieb.et Zucc.）提取物后,蒽醌类成分大黄素在大鼠组织中浓度进行测定,以期通过对虎杖的主要药效成分蒽醌类化合物的研究能够微观的反映虎杖在大鼠体内的组织分布过程,为阐明其药效物质基础提供科学依据。建立了检测大鼠肾脏、肺脏、肝脏、脾脏、心脏及肠中大黄素浓度的HPLC-UV方法,内标采用1,8-二羟基蒽醌,及检测脑组织中大黄素浓度的LC-MS/MS方法,组织样品的前处理方法均为液液萃取法。肾脏线性回归方程为y=0.2629x-0.0512,r=0.9995,线性范围为0.30～19.10μg/g,最低检测限为0.12μg/g,绝对回收率在91.7～101.6%之间。对肾脏样品进行了测定,实测达峰时间为30min,峰浓度为4.19±1.11μg/g。肺脏线性回归方程为y=0.3247x-0.0808,r=0.9997,线性范围为0.33～27.50μg/g,最低检测限为0.12μg/g,绝对回收率在97.0～102.9%之间。对肺脏样品进行了测定,实测达峰时间为10min,峰浓度为20.83±2.08μg/g。肝脏线性回归方程为y=0.1071x-0.0039,r=0.9995,线性范围为0.47～39.22μg/g,最低检测限为0.19μg/g,绝对回收率在84.4～101.2%之间。对肝脏样品进行了测定,实测达峰时间为10min,峰浓度为9.65±1.41μg/g。脾脏线性回归方程为y=0.3317x-0.0974,r=0.9935,线性范围为0.33～5.50μg/g,最低检测限为0.18μg/g,绝对回收率在91.3～98.6%之间。对脾脏样品进行了测定,实测达峰时间为15min,峰浓度为1.08±0.20μg/g。心脏线性回归方程为y=0.5298x+0.0271,r=0.9971,线性范围为0.11～2.20μg/g,最低检测限为0.06μg/g,绝对回收率在88.9～102.0%之间。对心脏样品进行了测定,实测达峰时间为10min,峰浓度为1.04±0.20μg/g。肠线性回归方程为y=0.2422x+0.0871,r=0.9999,线性范围为0.60～358.50μg/g,最低检测限为0.18μg/g,绝对回收率在92.8～97.2%之间。对肠样品进行了测定,小肠实测达峰时间为10min,峰浓度为142.18±14.22μg/g;大肠实测达峰时间为12h,峰浓度为99.58±3.23μg/g;盲肠实测达峰时间为7min,峰浓度为19.56±1.56μg/g。脑线性回归方程为y=137.68x-314.62,r=0.9999,线性范围为5.0～1000.0ng/g,最低检测限为1.5ng/g,绝对回收率在94.1～97.2%之间。对脑样品进行了测定,实测达峰时间为10min,峰浓度为808.5±30.1ng/g。结果分析得到:各组织中,肠中大黄素含量最高,含量从高到低依次为肠、肺脏、肝脏、肾脏、脾脏、心脏、脑,为虎杖临床应用提供相应数据。除肠外,虎杖提取物的大黄素能迅速分布于大鼠各组织,并且24小时基本消除完全。其分布与虎杖传统疗效相符,成功科学地反映了中药材虎杖药效物质的组织分布整体情况,为阐明其药效机理和临床进一步应用提供了科学依据。
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