论文摘要
膀胱癌是我国泌尿生殖系统中发病率最高的恶性肿瘤,其中大部分是浅表性膀胱癌,目前多采用经尿道膀胱肿瘤切除或膀胱部分切除,术后为预防复发多配合膀胱灌注治疗,目前常用的药物为卡介苗、丝裂霉素C、羟基喜树碱等。鸦胆子油乳是我国沈阳药科大学自行研制的中药制剂,自上世纪七十年代末应用临床治疗肿瘤以来,显示了良好的抗癌效果。对于膀胱肿瘤,鸦胆子油乳灌注治疗具有复发率低,副作用小,病人容易耐受等优点。因此研究鸦胆子油乳的作用机制对治疗膀胱癌具有十分重要的意义,本课题观察了不同浓度鸦胆子油乳对体外培养的膀胱癌细胞株J82细胞增殖的影响,检测作用过程中的Caspase-3活性,初步探讨其可能的作用机制,寻找分子水平依据。实验采用MTT法检测不同浓度鸦胆子油乳作用不同时间对J82细胞的抑制作用,Hoechst 33342染色不同浓度鸦胆子油乳作用J82细胞不同时间后荧光显微镜观察细胞形态,流式细胞术检测不同浓度鸦胆子油乳作用J82细胞后细胞凋亡率,应用Caspase-3活性试剂盒检测鸦胆子油乳作用后J82细胞Caspase-3活性。实验结果:不同浓度鸦胆子油乳作用后,J82细胞增殖受到抑制,其抑制作用有浓度及时间依赖性,在0.0～4.0 ml/L浓度下鸦胆子油乳抑制J82细胞的增殖,并呈现剂量-效应关系;鸦胆子油乳2.0 ml/L作用24 h后可见典型的凋亡现象;鸦胆子油乳处理组细胞样本Caspase-3活性与凋亡率高于空白对照组及鸦胆子油乳加Ac-DEVD-CHO处理组。以上结果提示,鸦胆子油乳对体外培养的膀胱癌细胞系J82细胞有明显抑制作用,可诱导肿瘤细胞发生凋亡,凋亡发生过程中检测到Caspase-3活性的增高,提示鸦胆子油乳诱导J82细胞凋亡可能通过Caspase-3凋亡途径,但具体过程还有待进一步研究。