长形肉豆蔻炮制工艺及作用研究

论文摘要

目的:肉豆蔻（学名）为《中国药典》2010版收载的中药,现在市场上出售的肉豆蔻有两种,一种是圆形肉豆蔻,另一种是长形肉豆蔻。在印度尼西亚市场上圆形肉豆蔻作为香料,长形肉豆蔻作为药用,而国内正好相反。因为对于长形肉豆蔻与圆形肉豆蔻的比较研究已经有所进展,所以本研究旨比较两种肉豆蔻的化学成分及药理作用,为长形肉豆蔻作为药用的一种进一步提供依据。材料与方法:1.材料:长形肉豆蔻药材购于安徽亳州,经辽宁中医药大学翟延君教授鉴定为肉豆蔻科植物长形肉豆蔻（Mystica argentea Warb.）的干燥成熟种仁。圆形肉豆蔻药材购于沈阳市药材公司,经辽宁中医药大学翟延君教授鉴定为肉豆蔻科植物肉豆蔻（Mystica fragrans Houtt.）的干燥成熟种仁。2.方法:（1）两种肉豆蔻的比较研究通过薄层色谱法和高效液相色谱法,分别对两种肉豆蔻及其炮制品,不同市售的长形肉豆蔻,肉豆蔻的不同药用部位进行比较,考察两种肉豆蔻成分的差异,为长形肉豆蔻成为药用的一种做进一步说明。（2）两种肉豆蔻炮制前后的药理作用研究在抗炎实验中,分别灌胃给与长形肉豆蔻生品,长形肉豆蔻制品,圆形肉豆蔻生品,圆形肉豆蔻制品高低剂量9天,通过二甲苯致小鼠耳肿胀,蛋清致大鼠足肿胀模型,测定肿胀度和抑制率,比较两种肉豆蔻及其炮制品的抗炎作用;在健脾实验中,采用苦寒泻下法和饥饱失常法复制大鼠脾虚模型,造模成功后灌胃给药4周后,测定大鼠骨骼肌线粒体中的Na+-K+-ATPase和Ca2+-Mg2+-ATPase的活性,考察两种肉豆蔻及其炮制品的健脾作用;在对胃肠功能影响的实验中,各组大鼠分别灌胃给药10天后,测定其血清胃泌素GAS,胃液pH值及改良Mett氏法测定胃蛋白酶的活性,进一步考察两种肉豆蔻炮制前后对脾胃的作用;在保护急性肝损伤的实验中,各组小鼠给药14天后,用含有0.12%CCl4的花生油造急性肝损伤模型,测定血清中ALT,AST,MDA,GST的含量,比较两种肉豆蔻炮制前后保护肝脏的作用。（3）通过对大鼠脾、胃、大肠中甲基丁香酚的含量分析,初步探索长形肉豆蔻在大鼠体内各脏器中的分布情况。结果:1.两种肉豆蔻的比较首先对薄层条件筛选,本实验的最佳薄层条件为石油醚-正己烷-氯仿-乙酸乙酯（11:2:1.5:1）;通过薄层色谱和高效液相色谱比较两种肉豆蔻及其炮制品,样品中各成分在量上有差异,长形肉豆蔻及其炮制品的有效成分甲基丁香酚和异甲基丁香酚含量高于圆形肉豆蔻及其炮制品,而毒性刺激性成分肉豆蔻醚和黄樟醚的含量低于圆形肉豆蔻及其炮制品;通过对不同市售的长形肉豆蔻的比较,不同地区出售的长形肉豆蔻在质量上有一定差异;通过薄层色谱法和高效液相色谱法的比较,肉豆蔻叶中成分含量较低,肉豆蔻衣中甲基丁香酚和异甲基丁香酚的含量比肉豆蔻叶中的高。2.两种肉豆蔻炮制前后的药理作用研究在抗炎实验中,两种肉豆蔻及其炮制品对小鼠耳肿胀,大鼠足肿胀均有一定的抑制作用,其中肉豆蔻生品效果最好;在健脾实验中,通过对大鼠骨骼肌线粒体ATPase活性的比较表明:脾虚模型组Na+-K+-ATPase ,Ca2+-Mg2+-ATPase的活性最低,空白对照组活性最高,其他各组与模型组比较,酶活性均相对的提高,而且脾虚症状有所缓解,其中长形肉豆蔻制品组效果最好;在对胃肠影响实验中,分别对大鼠血清胃泌素GAS,胃液pH值,胃蛋白酶进行测定,与模型组比较,各给药组的作用效果依次是长形肉豆蔻制品组>长形肉豆蔻生品组>圆形肉豆蔻制品组>圆形肉豆蔻生品组;在保护急性肝损伤实验中,各样品组与模型组比较,AST的含量显著降低,ALT的含量各组变化不大;与模型组相比,各给药组MDA的含量显著降低,其中长形肉豆蔻生品和圆形肉豆蔻生品组的效果最好;与模型组相比,各给药组均能升高GST水平,长形肉豆蔻制品组几乎同空白对照组达到相同效果。3.甲基丁香酚在组织中的分布长形肉豆蔻制品组中的甲基丁香酚在各脏器中的分布最多,尤其在脾胃中的含量远远高于大肠中的含量;在0.5h的时候,含量达到最高值,在接下来的时间逐渐减少。结论:1.长形肉豆蔻的指标性成分含量优于圆形肉豆蔻,初步认为长形肉豆蔻可以作为肉豆蔻的一种使用;不同市售的长形肉豆蔻,指标性成分含量有一定的差别;肉豆蔻衣的指标性成分与种仁的相似,可以进一步开发利用;2.两种肉豆蔻及其炮制品均有抗炎作用,但长形肉豆蔻生品对炎症的抑制率最大,提示抗炎宜生用;3.两种肉豆蔻及其炮制品均有健脾作用,能够显著提高Na+-K+-ATPase ,Ca2+-Mg2+-ATPase的活性,证实了肉豆蔻温中行气,健脾止泻之功,并能够提高胃肠运动失调大鼠的血清中胃泌素GAS含量,降低胃液pH值,提高胃蛋白酶活性的作用,且长形肉豆蔻的作用更强,再次验证了长形肉豆蔻可以作为肉豆蔻的一种使用;4.两种肉豆蔻及其炮制品对急性肝损伤小鼠有一定保护作用,而且长形肉豆蔻炮制后能够显著升高血清中GST含量,说明长形肉豆蔻炮制后对肝损伤保护作用增强。5.甲基丁香酚在脾胃中分布的最多,这与肉豆蔻归脾胃大肠经基本吻合,为以后深入研究提供了依据。综上所述,本实验继续对两种肉豆蔻进行比较研究。长形肉豆蔻炮制前后,甲基丁香酚和异甲基丁香酚含量均比圆形肉豆蔻多,但肉豆蔻醚的含量低,从化学成分方面,可以考虑替代圆形肉豆蔻使用。研究了两种肉豆蔻炮制前后对脾虚大鼠骨骼肌线粒体中ATPase的影响,实验结果与肉豆蔻温中行气,健脾止泻的功效相符合;两种肉豆蔻炮制前后对急性肝损伤大鼠均有保护作用,长形肉豆蔻的药理作用效果甚至优于圆形肉豆蔻,从药理作用方面,再次验证了长形肉豆蔻可以作为药用甚至可以替代圆形肉豆蔻使用。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 前言
• 文献综述
• 参考文献
• 第一章 长形肉豆蔻指标性成分研究
• 第一节 指标性成分的含量测定
• 第二节 挥发油化学成分变化研究
• 第二章 长形肉豆蔻炮制前后指标性成分比较研究
• 第一节 两种肉豆蔻及其炮制品的薄层条件的优选
• 第二节 不同市售长形肉豆蔻指标性成分比较
• 第三节 长形肉豆蔻不同药用部位的指标性成分比较
• 第三章 两种肉豆蔻炮制前后药理作用比较研究
• 第一节 两种肉豆蔻炮制前后的抗炎作用比较
• 第二节 两种肉豆蔻炮制前后对脾虚大鼠骨骼肌线粒体 ATPase 活性的比较
• 第三节 两种肉豆蔻及其炮制品对大鼠胃肠的影响
• 第四节 两种肉豆蔻炮制前后对小鼠急性肝损伤的保护作用比较
• 第四章 两种肉豆蔻及其炮制品中甲基丁香酚在大鼠体内的组织分布初探
• 分析讨论
• 结论
• 参考文献
• 致谢
• 个人简历
• 附图