论文摘要
蒲公英是一种分布广泛的多年生草本植物，因其丰富的营养成分、卓越的医用价值和良好的保健作用而越来越受到人们的重视，许多发达国家已视其为高级保健蔬菜。为了满足我国人民日常生活潜在的对蒲公英的需求，本试验利用叶片和根，采用组织培养的方式，对蒲公英再生体系进行了研究，同时对花药培养进行了初步探讨。结果表明：1．不同激素组合的培养基对叶片再生影响极显著。叶片再生的最佳培养基为MS+0.2mg／L NAA+1mg／L 6-BA和MS+0.2mg／L NAA+2mg／L 6-BA，其再生频率达到100％，平均再生不定芽数达到12个／外植体（叶块）。B5和MS培养基对叶片再生影响无显著差异。再生不定芽增殖培养的最佳培养基为MS+0.2mg／L 6-BA和MS+0.5mg／L 6-BA。叶片再生的最短再生周期为60d。经过增殖培养的再生周期需90d，其总的增值倍数可达到560倍。再生不定芽转入MS培养基生根，生根频率可达90％以上。2．叶片接种10d后，NAA水平（0.2～2mg／L）、NAA和BA交互作用水平对再生频率的影响达到极显著，BA水平（0.5～5.0mg／L）对再生频率的影响达到显著；20d和30d后，NAA水平对再生频率的影响达到极显著，BA水平和NAA与BA交互作用水平不显著。10d后，NAA水平对平均再生不定芽数的影响达到极显著，BA水平和交互作用对平均再生不定芽数的影响不显著。20d，30d后，NAA水平和BA水平对平均再生不定芽数的影响达到极显著，NAA与BA交互作用水平不显著。3．叶片再生体系相关分析得出：NAA（0.2～2mg／L）浓度与叶片再生频率、再生不定芽数极显著负相关，其相关度高于BA。不定芽高度与NAA浓度和BA浓度（0.5～5.0mg／L）负相关，随着两种激素浓度的升高，不定芽高度降低。4．叶片再生体系回归分析得出：再生频率与NAA浓度的平方成负相关，与6-BA浓度的平方成负相关；同时与NAA浓度和6-BA浓度的共同作用成正相关。平均再生不定芽数与NAA浓度，BA浓度的平方成负相关；与6-BA浓度，NAA浓度的平方及两激素浓度交互作用成正相关。5．不同激素组合的培养基对根再生影响极显著。根再生的最佳培养基为：MS+0.2mg／L 6-BA和MS+0.5 mg／L 6-BA，其再生频率达93％，平均再生不定芽数为5个／外植体（根段）。NAA与BA的组合使用时，根再生频率和平均再生不定芽数显著低于只使用BA的再生频率和平均再生不定芽数。再生不定芽转入MS培养基生根，生根频率可达90％以上。试验发现无菌根接种在含有6-BA的MS培养基中，先形成球状体结构，再形成不定芽，当培养基中有生长素NAA，没有形成球状体结构。通过石蜡切片观察发现，球状体结构的形成与根形成不定芽有一定的关系。6．不同浓度的BA对根再生影响极显著。50d 1 mg／L BA的再生频率显著低于0.2mg／L和0.5 mg／L BA的再生频率。0mg／L和1.0mg／L的BA对应的平均再生不定芽数极显著低于0.2mg／L和0.5mg／L的BA对应的平均再生不定芽数。培养基中同时使用NAA和BA，NAA水平、BA水平和交互作用水平，再生频率和平均再生不定芽数均达到显著。7．根再生体系相关分析得出：NAA浓度（0.2～2mg／L）与无菌根再生频率和平均再生不定芽数成显著负相关，BA浓度（0.5～5.0mg／L）与无菌根再生频率和平均再生不定芽数成负相关但没有达到显著水平。随着两种激素浓度的升高无菌根再生频率和平均再生不定芽数降低。8．根再生体系回归分析得出：平均再生不定芽数与NAA浓度，BA浓度的平方成负相关，与BA浓度，NAA浓度的平方及两激素浓度交互作用成正相关。9．根段在未加任何激素的MS培养基中可以快速一步直接成苗，减小了变异，有利于蒲公英品性的稳定，具有重要的应用价值。另外，对蒲公英花药培养进行了初步探讨。通过愈伤途径得到了花药的再生植株，对获得的花药植株进行倍性鉴定：未发现单倍体植株。